釀酒酵母響應(yīng)短期乙醇協(xié)迫的應(yīng)激機制的代謝組學研究.pdf

1、自工業(yè)革命以后，人類商品種類迅速豐富，從而對能源的需求量迅速增長。尋找可再生的清潔能源，是目前發(fā)展狀況下的一件非常重要的事。利用酵母發(fā)酵產(chǎn)乙醇是一個較為經(jīng)濟而且環(huán)保的生產(chǎn)可再生能源的方式;但還是存在一定的局限性。隨著發(fā)酵過程中乙醇的累積，釀酒酵母受到的毒害也越來越嚴重，漸漸地，細胞本身及其各細胞器形態(tài)和功能都會發(fā)生變化，當乙醇濃度累積到一定程度的時候，超過酵母的耐受極限，酵母就會死亡。所以，了解釀酒酵母響應(yīng)乙醇脅迫的應(yīng)激機制尤為重要。<

2、br>　　 首先，本文從釀酒酵母的生理情況入手，測得其生長的階段，再利用化學法監(jiān)測培養(yǎng)基中累積到的乙醇含量。二者結(jié)合，選擇進行乙醇脅迫的時間點，用不同濃度的乙醇(0％、3％、6％、9％、12％、15％)浸泡脅迫酵母細胞，測定其受到脅迫之后的衰以及細胞大小。發(fā)現(xiàn)實驗用菌種穩(wěn)定期很長，并伴有緩慢的二次生長，幾乎看不到衰亡期。確定脅迫時間為對數(shù)生長期中的8小時。發(fā)現(xiàn)死亡率不是隨著乙醇濃度的增大而線性增長，而是在達到一定濃度之后突然增加。隨著

3、乙醇濃度的升高，經(jīng)過脅迫后的細胞大小也逐漸發(fā)生變化，越來越小。
　　 其次，利用基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的代謝組分析平臺，分析不同濃度脅迫后的胞內(nèi)代謝物。利用主成分分析( PCA，principal component analysis)和偏最小二乘法(PLS，partial least squares)提取六組代謝物中的差異成分鑒定出了22種差異代謝物。
　　 最后，利用聚類分析衡量不同數(shù)據(jù)源間的相似性，用代謝的差異表達