地衣芽孢桿菌TS-01胞外多糖生產(chǎn)和功能的研究.pdf

1、地衣芽孢桿菌是一種益生菌,可用于人和動物腸胃紊亂的治療和預防,但其作用機理并不清晰.該論文主要從其發(fā)酵液中的多糖著手,研究地衣芽孢桿菌胞外多糖發(fā)酵條件、多糖中雜蛋白的去除、多糖的功能,初步探討其作用機制.實驗發(fā)現(xiàn),在該試驗設計中,當發(fā)酵培養(yǎng)基中玉米粉4﹪、豆餅粉2﹪、玉米漿0.3﹪、CaCl<,2>0.05﹪,K2HPO<,4>0.2﹪,初始pH為7,種子液菌齡為16小時,接種量為5﹪時,發(fā)酵液中活菌數(shù)和多糖產(chǎn)量都達到最高水平.另外,通

2、過適當控制搖床轉(zhuǎn)速、裝液量等以維持適當?shù)娜苎跛降囊蛩?也會影響多糖產(chǎn)量.多糖產(chǎn)量還跟地衣芽孢桿菌本身所分泌的α-淀粉酶、蛋白酶有一定關系.當發(fā)酵液中乙醇濃度為50﹪、70﹪時,分別得到兩種水溶性很好的多糖.用Sevag法去除多糖中雜蛋白時,樣品與氯仿-正丁醇體積比為4∶1,時間為30分鐘比較適宜,既能提高多糖得率,又能盡量除去蛋白質(zhì).如用酶法脫除蛋白,宜用胰蛋白酶,用量為2.0U/mg,時間為4小時.相比之下,酶法稍好于Sevag法,

3、但酶法操作較復雜,時間稍長.當DPPH溶液濃度為5×10<'-5>mol/L時,兩種多糖溶液對DPPH的IC<,50>(抑制率為50﹪時多糖的濃度)均為3.2×10<'-4>g/mL,表明所提兩種多糖有較強的清除自由基的效果.發(fā)酵上清液中所添加多糖劑量為5mg/mL時,能顯著增加發(fā)酵液中SOD酶活(P<0.01).表明多糖具有較強的抗氧化能力.用MTT法進行了T、B淋轉(zhuǎn)實驗,結(jié)果表明兩種多糖在一定濃度時,能增強T、B淋巴細胞轉(zhuǎn)化作用,間