蜂蜜、甜型葡萄酒和桔子原汁中主要糖類及其它主成分的NMR定量研究.pdf

1、蜂蜜、甜型葡萄酒和桔子原汁中主要糖類包括葡萄糖、果糖和蔗糖，測定糖類的傳統(tǒng)方法有多種，如：測總含糖量的方法有鹽酸一酚法、葸酮比色法等，測還原糖含量方法有直接法、間接法、3，5—二硝基水楊酸法等。鹽酸—酚法和蒽酮比色法都須加酸、加溫處理糖，使之脫水產(chǎn)生糠醛或羥甲基糠醛，而與酚類化合物或蒽酮反應(yīng)生成有色物質(zhì)，在生成物產(chǎn)生過程中，溫度、酸度等都會影響糠醛或羥甲基糠醛的轉(zhuǎn)化率，糖類不同，轉(zhuǎn)化率也不一樣，誤差較大。直接法、間接法都必須在加溫條件下

2、進行，反應(yīng)液堿度、熱源強度、煮沸時間、滴定速度和終點誤差等操作因素對測定結(jié)果影響很大，甚至相同的人操作，兩次滴定結(jié)果都相差較遠。3，5—二硝基水楊酸法測糖須在堿性條件下加熱，還原糖才能將3，5—二硝基水楊酸還原為棕紅色的3—氨基—5—硝基水楊酸，堿度和溫度影響實驗結(jié)果，產(chǎn)生較大誤差。應(yīng)用直接法、間接法、3，5—二硝基水楊酸法測總糖時，還須用酸水解法使沒有還原性的雙糖和多糖降解成有還原性的單糖，然后進行測定，這個過程同樣涉及到溫度、酸堿度

3、等影響因素，且操作繁瑣。檸檬酸的測定有高效液相色譜法以及衍生化氣相色譜法：乙醇的測定有比重法、氣相色譜法等。若選用傳統(tǒng)方法來檢測蜂蜜、甜型葡萄酒和桔子原汁，不但步驟多、操作復(fù)雜，且有時偏差較大，給蜂蜜、甜型葡萄酒和桔子原汁標(biāo)準(zhǔn)制定帶來很多不便。
　　 本文以蜂蜜、甜型葡萄酒和桔子原汁作樣品，運用1H—NMR譜、H—HCOSY譜、13C—NMR譜、DEPT譜、HSQC譜、HMBC譜，對三種主要糖及其差向異構(gòu)體、檸檬酸、乙醇進行了指

4、紋歸屬，確立了用于定量分析的相關(guān)質(zhì)子特征峰，選用鄰苯二甲酸氫鉀作內(nèi)標(biāo)，通過相關(guān)質(zhì)子特征峰的積分值同時檢測了葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸和乙醇的絕對含量。在對蜂蜜、甜型葡萄酒及桔子汁中葡萄糖、果糖、蔗糖三種主要糖進行分析時，同時也對甜型葡萄酒中檸檬酸和乙醇及桔子汁中檸檬酸進行了分析。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　 1．用重水作溶劑時葡萄糖存在α—D—P比喃葡萄糖和β—D—吡喃葡萄糖兩種主要構(gòu)型，果糖存在α—D—呋喃果糖、β—D—呹喃

5、果糖和β—D—吡喃果糖三種主要構(gòu)型，并對葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸結(jié)構(gòu)進行了全面歸屬；考察了葡萄糖在水中的平衡條件，證明葡萄糖和果糖在混合體系中各種構(gòu)型的百分組成是穩(wěn)定的。
　　 2．葡萄糖、果糖和蔗糖存在蜂蜜中，運用模擬譜證實了蜂蜜中存在葡萄糖、果糖和蔗糖，對葡萄糖和果糖進行了指紋歸屬，根據(jù)相關(guān)質(zhì)子特征峰對蜂蜜中葡萄糖、果糖、蔗糖進行了定量分析，葡萄糖、果糖和蔗糖回收率分別為96.68％、98.03％、95.56％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏

6、差分別為0.33％、0.17％、1.34％。對變質(zhì)蜂蜜結(jié)晶成分進行了分析，葡萄糖和果糖百分含量分別為64.93％、10.93％。對變質(zhì)蜂蜜液體部分主要糖類進行了分析，葡萄糖、果糖和蔗糖百分含量分別為27.4％、30.65％、0.96％。
　　 3．采用核磁共振一維和二維技術(shù)，確認(rèn)了甜型葡萄酒中存在葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸和乙醇，并對它們進行了指紋歸屬，根據(jù)相關(guān)質(zhì)子特征峰進行了定量分析，作了回收率實驗，葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸

7、和乙醇的回收率分別為96.88％、95.74％、99.02％、97.17％、96.21％。
　　 4．采用核磁共振一維和二維技術(shù)，確認(rèn)了桔子原汁中葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸的存在，并對它們進行了指紋歸屬，根據(jù)相關(guān)質(zhì)子特征峰對桔子原汁中葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸進行了定量分析，蜜桔中葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸的百分含量分別為0.65％、0.78％、2.46％、0.31％，沙糖桔中葡萄糖、果糖、蔗糖、檸檬酸的百分含量分別為1.94％