單側腎上腺切除對哮喘大鼠嗜鉻細胞轉變的細胞及補腎方的干預作用.pdf

1、目的：本研究旨在通過建立腎陽虛模型來探討單側腎上腺切除對哮喘大鼠腎上腺嗜鉻細胞轉變的影響及補腎方的干預作用，從而進一步揭示嗜鉻細胞表型轉變與哮喘發(fā)病的關系。
　　 方法：用卵蛋白致敏、激發(fā)方法建立哮喘模型，56只雄性SD大鼠隨機分為7組，分別為哮喘組、單側腎上腺切除哮喘組(手術哮喘組)、補腎哮喘組(補腎組)、單側腎上腺切除補腎哮喘組(手術補腎組)、地塞米松哮喘組(地米組)、單側腎上腺切除地塞米松哮喘組(手術地米組)及正常對照組。

2、采用全身體積描計法檢測各組大鼠氣道阻力變化情況；光鏡觀察各組人鼠腎上腺髓質的病理改變，電鏡觀察各組火鼠腎上腺髓質嗜鉻細胞的超微結構；免疫組化法檢測腎上腺髓質中苯乙醇胺-N-甲基轉移酶(PhenylethanolamineN-methyl transferase，PNMT)、GDP解離抑制因子(Rho GDPdissociation inhibitorα，Rho GDIα)及外周蛋白(Peripherin)的表達；RT-PCR和weste

3、rn blot法分別檢測腎上腺髓質中Rho GDIα、Peripherin mRNA及其蛋白質的表達水平；ELISA法檢測各組大鼠血清中腎上腺素(Epinephrine，EPI)水平的變化。
　　 結果：⑴與正常對照組相比，哮喘組大鼠腎上腺髓質結構破壞明顯，可見空泡變性或脂質增多，氣道周圍可見大量炎癥細胞浸潤；手術哮喘組大鼠的腎上腺髓質及肺臟結構破壞則較哮喘組進一步加劇，補腎組和地米組腎上腺髓質及肺臟結構破壞較哮喘組減輕；與手術

4、哮喘組相比，手術補腎組和手術地米組腎上腺髓質及肺臟結構破壞較輕。電鏡下，對照組腎上腺髓質嗜鉻細胞形態(tài)規(guī)整，線粒體結構清晰，嗜鉻顆粒數(shù)目多，密度均勻；與對照組相比，哮喘組嗜鉻細胞胞漿及線粒體出現(xiàn)腫脹，分泌顆粒減少；手術哮喘組除了上述表現(xiàn)，還可見髓質嗜鉻細胞出現(xiàn)凋亡及突起樣改變，而補腎組和地米組結構破壞程度較哮喘組有所減輕；與手術哮喘組相比，手術補腎組和手術地米組腎上腺髓質嗜鉻細胞病變減輕。⑵與對照組相比，哮喘組大鼠髓質嗜鉻細胞中PNMT的

5、表達及血清中EPI水平明顯降低(P<0.05)；與哮喘組相比，手術哮喘組較哮喘組進一步降低(P<0.05)，而補腎組和地米組中PNMT及EPI的表達增高(P<0.05)；與手術哮喘組相比，其在手術補腎組和手術地米組表達增高(P<0.05)。⑶Rho GDIα與PNMT的表達趨勢相類似，在對照組中，Rho GDIα有明顯的表達；與對照組相比，哮喘組表達降低(P<0.05)；與哮喘組相比，手術哮喘組較哮喘組進一步降低(P<0.05)，而補腎

6、組和地米組表達增高(P<0.05)；與手術哮喘組相比，手術補腎組和手術地米組表達增高(P<0.05)。⑷在各組大鼠腎上腺髓質嗜鉻細胞中均可見Peripherin的表達，與對照組相比，Peripherin在哮喘組表達增高(P<0.05)；與哮喘組相比，手術哮喘組中表達進一步增高(P<0.05)，補腎組和地米組表達降低(P<0.05)；與手術哮喘組相比，手術補腎組和手術地米組表達降低(P<0.05)。
　　 結論：①單側腎上腺切除能