海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷內皮細胞的干預作用.pdf

1、目的：建立腎上腺素直接損傷家兔股動脈內皮細胞的血栓模型，研究海帶多糖L01對腎上腺素致血管內皮細胞(VEC)損傷的干預作用，從VEC形態(tài)學結構和抗凝血功能兩方面探討海帶多糖L01對VEC的保護作用。
　　 方法：將實驗家兔分成五組：生理鹽水組、腎上腺素組、海帶多糖低劑量組、海帶多糖高劑量組和依諾肝素組，通過插管于股動脈游離段分別注入生理鹽水、生理鹽水-腎上腺素液、低劑量海帶多糖-腎上腺素液，高劑量海帶多糖-腎上腺素液和依諾肝素-

2、腎上腺素液，保留25min后，動脈插管連接生物信號記錄系統(tǒng)(BL系統(tǒng))，觀察血壓曲線，當曲線變?yōu)橹本€即為血栓形成，記錄血栓形成時間，以此來評估內皮細胞抗凝血功能的改變。取與藥物接觸的股動脈段，用4％多聚甲醛固定，切片HE染色，觀察血管內皮層的完整情況，以此來評估內皮細胞結構損傷程度。同時將標本作TF蛋白免疫組化，以未脫落棕色內皮層長度與血管內壁總長的比值表示內皮細胞層的完整程度，以血管平均灰度值表示TF在內皮層和內皮下組織的表達情況，從

3、另一方面來評價內皮細胞功能受損程度。
　　 結果：腎上腺素組(19.99±1.92min)血栓形成時間顯著短于其它各組(P＜0.01)，生理鹽水組血栓形成時間(57.38±3.85min)與依諾肝素組(54.69±4.35min)無明顯差別(P＞0.05)，海帶多糖低劑量組血栓形成時間(33.04±3.05min)較海帶多糖高劑量組(46.94±4.31min)明顯縮短(P＜0.01)。
　　 股動脈血管內皮HE染色病理

4、切片顯示，生理鹽水組內皮層完整、光滑、無缺損。腎上腺素組有大段內皮層脫落、缺失。低劑量海帶多糖組大體完整，局部有內皮細胞脫落。海帶多糖高劑量組內皮層完整，局部可見與皮下組織分離。依諾肝素組較完整，局部表面粗糙。
　　 股動脈內皮TF蛋白免疫組化顯示，腎上腺素組內皮層以及內皮下組織均被染成棕褐色；生理鹽水組內皮層染色較淺，呈淺黃色，內皮下組織基本無染色；依諾肝素組內皮層染色較生理鹽水組較深，且內皮下組織可見少量染色區(qū)域；低劑量海帶

5、多糖L01組其內皮層被染成棕黃色，內皮下組織亦有少量棕黃色染色區(qū)域；L01高劑量組內皮層被染成淺黃色，且內皮層下淡黃色染色區(qū)域較少。測量各組內皮層平均灰度值顯示，腎上腺素組平均灰度值(41.12±10.12)較其它各組明顯減小(P＜0.01)，而海帶多糖低劑量組(68.75±13.21)與海帶多糖高劑量組(85.00±7.37)平均灰度值無顯著差別(P＞0.05)。病理圖像分析儀檢測內皮層完整程度顯示，海帶多糖高劑量組(64.35±3.