補(bǔ)腎益精法對(duì)衰老大鼠羰基毒化的干預(yù)作用.pdf

1、目的
　　 D-半乳糖頭頸部皮下注射建立亞急性衰老大鼠模型,各組分別給予生理鹽水、維生素E、二精靈復(fù)方及正常飲食,檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、血液粘度、腦肝腎組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、蛋白羰基水平、4-羥基壬烯醛(4-HNE)蛋白表達(dá)水平,探討補(bǔ)腎益精法對(duì)衰老模型大鼠羰基毒化的干預(yù)作用,以期明確腎精虧虛與衰老的關(guān)系以及補(bǔ)腎益精法在延緩衰老中的作用機(jī)理,為提高老年人生活質(zhì)量開拓新思路,為補(bǔ)腎益精法延緩衰老

2、在臨床上的應(yīng)用提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 將44只SPF級(jí)wistar雄性大鼠,體重200±20g,隨機(jī)分為4組,正常組、模型組、維生素E組、二精靈復(fù)方組。模型組、維生素E組、二精靈復(fù)方組分別采用頭頸部皮下注射D-半乳糖造模,造模同時(shí)正常組、模型組給予生理鹽水灌胃,維生素E組給予維生素E灌胃,二精靈復(fù)方組給予二精靈復(fù)方水煎液灌胃。造模及給藥6周后,進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,隨后取大鼠血液檢測(cè)血液粘

3、度,取大鼠腦、肝、腎組織檢測(cè)SOD活性、MDA含量、蛋白羰基水平、4-HNE蛋白表達(dá)水平及HE染色法觀察海馬組織CA1區(qū)形態(tài)結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果：
　　 1.Morris水迷宮檢測(cè)
　　 定位航向?qū)嶒?yàn)中,各組大鼠逃避潛伏期均呈逐漸縮短趨勢(shì)。與正常組相比,模型組大鼠逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P＜0.05,P＜0.01)?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中,與正常組相比,模型組大鼠在目標(biāo)象限停留時(shí)間明顯縮短(P＜0.01),穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少

4、(P＜0.01),20％外環(huán)區(qū)域百分比明顯增加(P＜0.01)。與模型組相比,二精靈復(fù)方組目標(biāo)象限停留時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.01),穿越平臺(tái)次數(shù)明顯增加(P＜0.05),20%外環(huán)區(qū)域百分比明顯減少(P＜0.05)。
　　 2.血粘度檢測(cè)
　　 與正常組相比,模型組低切(全血1、全血5)、中切(全血50、全血100)、高切(全血200)全血粘度明顯增高(P＜0.05)、血漿粘度顯著增高(P＜0.01)、紅細(xì)胞壓積明顯升高

5、(P＜0.05)。與模型組相比,二精靈復(fù)方組全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積均明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。與維生素E組相比,二精靈復(fù)方組全血粘度和紅細(xì)胞壓積均有較好治療效果,但無顯著性差異。
　　 3.腦、肝、腎SOD活性、MDA含量、蛋白羰基含量
　　 與正常組相比,模型組大鼠SOD活性明顯降低(P＜0.01)、MDA含量明顯增高(P＜0.05,P＜0.01)、蛋白羰基水平明顯升高(P＜0.01)。與模型組相

6、比二精靈復(fù)方組SOD活性明顯升高、MDA含量明顯降低、蛋白羰基水平明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。與維生素E組相比,二精靈復(fù)方組有較好治療效果,但無顯著性差異。
　　 4.免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)4-HNE加成蛋白表達(dá)結(jié)果
　　 與正常組相比,模型組大鼠IOD值明顯升高(P＜0.01);與模型組相比二精靈復(fù)方組IOD值明顯降低(P＜0.01)。
　　 5.海馬組織CA1區(qū)組織形態(tài)觀察
　　 正常組椎

7、體細(xì)胞層染色清晰,細(xì)胞排裂整齊致密,胞核淺染,分布均勻。模型組海馬組織CA1區(qū)椎體細(xì)胞層排列紊亂,核深染、固縮、斷裂。二精靈復(fù)方組、維生素E組,細(xì)胞形態(tài)明顯改善。
　　 結(jié)論：
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,造模后,模型組大鼠逃避潛伏期、20%外環(huán)區(qū)域百分比明顯多于正常組大鼠,目標(biāo)象限停留時(shí)間、穿越平臺(tái)次數(shù)明顯低于正常組大鼠,證明我們實(shí)驗(yàn)造模成功,為后繼實(shí)驗(yàn)提供了可靠的衰老模型。同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明,補(bǔ)腎益精法可以顯著提高衰老模型大