補(bǔ)腎填精疏肝法延緩衰老的理論及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：從中醫(yī)肝腎與衰老的關(guān)系入手，采用D-半乳糖(D-gal)頸背部皮下注射方法建立亞急性衰老大鼠模型，觀察補(bǔ)腎填精疏肝法對實(shí)驗(yàn)大鼠胸腺重量指數(shù)，血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，腦組織去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羥色胺(5-HT)，肝、腎臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)等指標(biāo)的影響，從免疫、自由基、神經(jīng)、形態(tài)學(xué)角度初步探討補(bǔ)腎填精疏肝法延緩衰老的作用機(jī)制，為以后的實(shí)驗(yàn)及臨床研究打下基礎(chǔ)。 方法： 1.分組：清

2、潔級(jí)wistar雄性大鼠50只，體重280±10g，隨機(jī)分為5組，即正常對照組，模型組、補(bǔ)腎填精組、疏肝組、補(bǔ)腎填精疏肝組。 2.造模：將D-半乳糖溶于生理鹽水中，配成濃度為5％的D-半乳糖溶液。除正常對照組外，余四組大鼠均頸背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg，每日一次，連續(xù)42天。 3.給藥：造模第11天開始灌胃給藥，補(bǔ)腎填精組、疏肝組、補(bǔ)腎填精疏肝組分別用補(bǔ)腎填精方、疏肝方、補(bǔ)腎填精疏肝方灌胃，每日一次。

3、 4.檢測：造模結(jié)束后即實(shí)驗(yàn)第43天取血、腦、胸腺、肝、腎等組織，檢測實(shí)驗(yàn)大鼠胸腺重量指數(shù)，血清SOD、MDA，腦組織NE、DA、5-HT等指標(biāo)，觀察肝、腎臟組織結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果：八天后模型組大鼠即出現(xiàn)精神萎靡少動(dòng)，行動(dòng)遲緩，皮毛枯黃，失去光澤，皮膚彈性下降，眼球混濁不清等衰老體征，持續(xù)加重直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 1.免疫學(xué)指標(biāo)的比較對胸腺重量指數(shù)的影響：與正常對照組比較，模型組胸腺重量指數(shù)明顯降低(P<0.01)；與模型組比

4、較，補(bǔ)腎填精組、補(bǔ)腎填精疏肝組能顯著提高胸腺重量指數(shù)(P<0.05)；各治療組之間比較，以補(bǔ)腎填精組、補(bǔ)腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 2.自由基指標(biāo)的比較。 2.1 對血清SOD的影響：與正常對照組比較，模型組SOD含量明顯下降(P<0.01)；與模型組比較，各治療組均可顯著提高SOD的療效(P<0.01)；各治療組之間比較，以補(bǔ)腎填精組、補(bǔ)腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 2.2對血清MDA的

5、影響：與正常對照組比較，模型組MDA含量明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，各治療組均能明顯降低MDA的含量(P<0.01)；各治療組之間比較，補(bǔ)腎填精疏肝組降低MDA含量的療效較優(yōu)(P<0.05或P<0.01)。 3.單胺類神經(jīng)遞質(zhì)指標(biāo)的比較。 3.1對腦組織NE的影響：與正常對照組比較，模型組NE含量明顯降低(0.01)；與模型組比較，補(bǔ)腎填精組、補(bǔ)腎填精疏肝組有明顯提高NE含量的療效(P<0.01)；各治療組之

6、間比較，補(bǔ)腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 3.2對腦組織DA的影響：與正常對照組比較，模型組DA含量明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，各治療組均有極顯著提高DA含量的療效(P<0.01)；各治療組之間比較，補(bǔ)腎填精組、補(bǔ)腎填精疏肝組的療效較優(yōu)(P<0.01)。 3.3對腦組織5-HT的影響：與正常對照組比較，模型組5-HT的含量有所下降(P<0.01)，補(bǔ)腎填精疏肝組無顯著性差異(P<0.05)；與模型組比

7、較，各治療組均能不同程度的提高5-HT的含量；各治療組之間比較，補(bǔ)腎填精疏肝組提高5-HT含量的療效較優(yōu)(P<0.05或P<0.01)。 4.肝、腎臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的比較。 4.1對肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響：與正常對照組比較，模型組肝小葉結(jié)構(gòu)不清，肝細(xì)胞排列紊亂，體積增大，呈水樣及氣球樣變性，胞漿可見明顯的疏松、腫脹，灶性壞死，大部分肝竇消失不見；與模型組比較，各治療組對肝細(xì)胞、肝竇、炎細(xì)胞等方面均有不同程度的改善，其中補(bǔ)腎填精

8、疏肝組效果最優(yōu)。 4.2對腎臟組織結(jié)構(gòu)的影響：與正常對照組比較，模型組腎小球體積普遍增大，可見球內(nèi)毛細(xì)血管萎縮，細(xì)胞核深染、固縮，球囊腔增寬，內(nèi)可見蛋白性滲出物，大部分腎小管呈囊性擴(kuò)張，上皮細(xì)胞空泡變性，蛋白管型較多見，間質(zhì)細(xì)胞增生較多；與模型組比較，各治療組對腎小球、腎小管、上皮及間質(zhì)細(xì)胞等方面均有不同程度的改善，其中補(bǔ)腎填精疏肝組效果最優(yōu)。 結(jié)論： 1.補(bǔ)腎填精疏肝法提高亞急性衰老模型大鼠胸腺重量指數(shù)、血清S

9、OD、腦組織NE、DA、5-HT含量，降低血清MDA含量，改善肝、腎臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷的療效最優(yōu)。 2.補(bǔ)腎填精、疏肝、補(bǔ)腎填精疏肝三方對亞急性衰老模型大鼠均有不同程度的增強(qiáng)免疫功能、抗氧化、清除自由基、恢復(fù)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)代謝水平、改善肝、腎臟組織結(jié)構(gòu)損傷的作用，治療效果為補(bǔ)腎填精疏肝方優(yōu)于前二者，說明補(bǔ)腎填精法、疏肝法均是抗衰老的有效方法，而二者結(jié)合的治療效果更優(yōu)。 3.衰老是一個(gè)全身各系統(tǒng)逐漸衰退的過程，因此研究衰老