紅花中兩種紅花黃色素的提取分離及其組合凍干粉針劑的初步研究.pdf

1、紅花為菊科一年生草本植物紅花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花，具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛的功效，是傳統(tǒng)的活血化瘀類中藥，花中所富含的黃色素(SY)類成分是主要的活性部位，羥基紅花黃色素A(HSYA)和紅花黃色素A(SYA)又是SY中的主要組成部分。本課題針對SY熱不穩(wěn)定的特點，以新疆霍城產(chǎn)的紅花為研究對象，提取、分離、純化了HSYA和SYA，并采用低溫干燥技術(shù)對其進行了粉針劑的研究，為紅花資源的開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。

2、
　　 本文首先以市售紅花注射液為對照，利用高效液相色譜(HPLC)技術(shù)對復(fù)雜樣品的高分離能力對紅花藥材水提液加熱前后的成分變化進行了研究分析，揭示了SY家族的組成情況及其熱不穩(wěn)定性變化規(guī)律，提示紅花中HSYA和SYA兩種成分純化以及低溫凍干工藝研究的必要性。
　　 本文在提取工藝研究方面，考察了紅花中兩種SY成分的提取、純化方法。以水為提取溶媒進行提取，大孔吸附樹脂技術(shù)進行富集，反相C18柱和sephadex LH-2

3、0凝膠柱分離、純化；在提取、純化過程中采用聚酰胺薄膜和HPLC指紋圖譜技術(shù)跟蹤檢測，優(yōu)化了提取、純化工藝，并結(jié)合光譜技術(shù)對純品進行了結(jié)構(gòu)確證。
　　 為配合兩種SY的提取，本文建立了HPLC同步測定了紅花藥材中HSYA與SYA的含量方法。采用Akasil C18(4.6 mm×250mm，5μm)色譜柱，以乙腈(A)-0.4％磷酸(B)為流動相，梯度洗脫(0～30 min，10％A；30～50min,15％A；50～55min,

4、25％A；55～60min,10％A),流速0.7mL·min-1，檢測波長403nm，柱溫30℃。結(jié)果：HSYA、SYA進樣量的線性范圍分別為0.451～1.05μg(r=0.9993)和0.278～0.650μg（r＝0.9996）(μ=5)；平均加樣回收率（n=6）分別為100.6％和103.0％。本方法快速、靈敏，重復(fù)性好。
　　 本文在劑型研究方面，采用低溫凍干技術(shù)對HSYA和SYA組合物的粉針劑進行了初步研究。通過正

5、交試驗方法確定了凍干粉針劑的配方為：HSYA10g，SYA6g，甘露醇20g，EDTA-2Na6.4(0.04％)，調(diào)節(jié)pH為6.O；用0.05％活性炭脫色，加注射用水至2000mL(2mL/瓶)；考察了初步穩(wěn)定性；確定了分析方法。
　　 本文在藥效研究方面，對HSYA和SYA的抗凝血及抗血小板聚集作用進行了初步考察。以PH=7.4的生理鹽水為陰性對照，肝素鈉為陽性對照，采用體外實驗的方法對兩者抗凝血及抗血小板聚集作用進行檢測。