堿性成纖維細胞生長因子對帕金森病神經遞質的影響及其保護機制研究.pdf

1、帕金森?。≒arkinson's disease，PD）是一種好發(fā)于中老年人的中樞神經退行性疾病，主要病理特征在于黑質-紋狀體內多巴胺(DA)能神經元的變性，導致腦部神經遞質DA缺乏。PD病變復雜，發(fā)病機制尚未完全闡明，普遍認為是一種與一些神經遞質系統(tǒng)相關的可逐漸惡化的多中心神經變性疾病，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為靜止性震顫、運動遲緩、肌僵直和姿勢平衡障礙。帕金森病手術治療昂貴，目前還是以藥物治療為主。但已有的抗帕金森病藥物只起著改善癥狀的作

2、用，不能延緩疾病的進程，不能預防DA能神經元的退變，且長期服用，其用量越來越大，副作用越來越多。近年來，帕金森病藥物治療由直接補充DA轉向多環(huán)節(jié)治療，重點集中于對DA能神經元的保護作用。目前許多研究者關注應用神經營養(yǎng)因子和生長因子治療帕金森病，其中堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)作為一類生長因子，具有促有絲分裂的作用，在人體組織上含有豐富的受體，在體內和體外均具有活性，主要通過與細胞表面的酪氨酸激酶型受體作用而發(fā)揮著廣泛的生物學功能，

3、在組織創(chuàng)傷修復和神經保護等方面起著重要的作用。
　　本論文從PD病變源頭—神經元的營養(yǎng)修護角度，從動物行為學、神經遞質含量、神經元數(shù)目等方面的變化來研究bFGF對PD腦內神經遞質的影響，并通過檢測多種相關生化指標初步來闡明bFGF修護神經元和影響PD神經遞質可能的作用機制。具體內容包括以下三點:
　　(1)建立了由神經毒素6-羥基多巴(6-OHDA)誘發(fā)的帕金森病細胞模型。在細胞水平上，bFGF能夠提高帕金森病PC12模型細

4、胞的成活率，降低6-OHDA引起的PC12細胞凋亡，促進細胞中相關單胺類神經遞質及其代謝產物的分泌，刺激帕金森病模型細胞中酪氨酸羥化酶(TH)的表達。同時bFGF能提高帕金森病模型細胞中磷酸化Akt和ERK的蛋白水平，抑制細胞中內質網應激蛋白（CHOP、GRP78和CASPASE12）的表達，提示bFGF可能通過激活PI3K/Akt和ERK1/2通路來抑制6-OHDA氧化損傷引起的內質網應激，降低神經細胞凋亡，從而實現(xiàn)神經保護作用。

5、r>　　(2)采用腦立體定位注射6-OHDA構建了PD大鼠偏側模型，并通過腹腔注射阿撲嗎啡溶液引起的動物行為學來驗證模型的成功。在動物水平上，bFGF可以有效改善模型動物的帕金森病癥狀;提高大鼠腦紋狀體組織中細胞外液和細胞內外總的單胺類神經遞質含量;促進腦部黑質和紋狀體中TH的表達。此外，bFGF能促進PD大鼠腦內自由基的清除，上調PD大鼠損毀側紋狀體中磷酸化Akt和ERK的水平，抑制內質網應激蛋白（CHOP、GRP78和CASPASE

6、12）以及α-Syn蛋白的表達，提示bFGF可能通過激活PI3K/Akt和ERK1/2通路，抑制6-OHDA氧化損傷引起的內質網應激和α-Syn蛋白水平，促使TH的表達提高，降低DA能神經元凋亡，增加神經遞質的合成，最終表現(xiàn)出PD癥狀改善，實現(xiàn)帕金森病的神經保護作用。
　　(3)以基于1H NMR的代謝組學方法對PD大鼠腦紋狀體進行研究，發(fā)現(xiàn)PD大鼠腦紋狀體中乳酸、γ-氨基丁酸、谷氨酸、肌酸、甘氨酸和肌醇含量增加;N-乙酰天門冬氨

7、酸、?；撬岬暮繙p少。提示PD腦中形成了興奮性毒性，參與了DA能神經元凋亡。經過bFGF治療后，PD大鼠腦紋狀體中γ-氨基丁酸、N-乙酰天門冬氨酸和?；撬岬暮棵黠@上升;谷氨酸、肌醇和乳酸的含量明顯下降。表明bFGF能使紋狀體中失衡的氨基酸類神經遞質向常態(tài)恢復，改善星形膠質細胞增生，促進星形膠質細胞營養(yǎng)因子的分泌，對DA能神經元具有營養(yǎng)和修護作用。
　　總而言之，本論文研究了bFGF用藥前后帕金森病神經遞質的變化，以及內質網應激和