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文檔簡介
1、目的:
研究糖尿病創(chuàng)面糖化堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的形成及作用途徑。
方法:
1.免疫共沉淀檢測糖尿病及非糖尿病皮膚和肉芽組織中糖化bFGF的含量差異;
2. HE染色觀察糖尿病及非糖尿病皮膚創(chuàng)面組織中血管數(shù)量的改變;
3. CCK-8檢測人真皮微血管內皮細胞(HDMEC)經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預后以及分別阻斷晚期糖化終末產(chǎn)物受體(RAGE)途徑和生長因子受體(FGFR)途
2、徑的經(jīng)糖化bFGF干預后的增殖;
4.流式細胞儀檢測HDMEC經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預后以及分別阻斷RAGE和FGFR途徑的經(jīng)糖化bFGF干預后的凋亡;
5. Matrigel檢測HDMEC經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預后以及分別阻斷RAGE和FGFR途徑的經(jīng)糖化bFGF干預后的血管形成功能。
結果:
1.免疫共沉淀結果表明,糖尿病皮膚及肉芽組織中糖化bFGF的含量增高;
2. HE染
3、色表明,糖尿病皮膚創(chuàng)面中血管數(shù)明顯減少;
3. CCK-8結果表明,bFGF明顯促進HDMEC增殖且呈時間依賴性;阻斷RAGE途經(jīng)后,糖化bFGF對細胞增殖的抑制作用減弱;
4.流式細胞檢測結果表明,HDMEC經(jīng)長時間糖化 bFGF干預后凋亡增加;阻斷RAGE途徑后,糖化bFGF的促凋亡能力下降;
5. Matrigel表明,糖化bFGF抑制HDMEC形成血管;阻斷RAGE途經(jīng)后,糖化bFGF抑血管化減弱。
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