糖尿病創(chuàng)面糖化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子形成及其血管化效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：
　　研究糖尿病創(chuàng)面糖化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）的形成及作用途徑。
　　方法：
　　1.免疫共沉淀檢測(cè)糖尿病及非糖尿病皮膚和肉芽組織中糖化bFGF的含量差異；
　　2. HE染色觀察糖尿病及非糖尿病皮膚創(chuàng)面組織中血管數(shù)量的改變；
　　3. CCK－8檢測(cè)人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HDMEC）經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預(yù)后以及分別阻斷晚期糖化終末產(chǎn)物受體（RAGE）途徑和生長(zhǎng)因子受體（FGFR）途

2、徑的經(jīng)糖化bFGF干預(yù)后的增殖；
　　4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)HDMEC經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預(yù)后以及分別阻斷RAGE和FGFR途徑的經(jīng)糖化bFGF干預(yù)后的凋亡；
　　5. Matrigel檢測(cè)HDMEC經(jīng)bFGF和糖化bFGF干預(yù)后以及分別阻斷RAGE和FGFR途徑的經(jīng)糖化bFGF干預(yù)后的血管形成功能。
　　結(jié)果：
　　1.免疫共沉淀結(jié)果表明，糖尿病皮膚及肉芽組織中糖化bFGF的含量增高；
　　2. HE染

3、色表明，糖尿病皮膚創(chuàng)面中血管數(shù)明顯減少；
　　3. CCK－8結(jié)果表明，bFGF明顯促進(jìn)HDMEC增殖且呈時(shí)間依賴性；阻斷RAGE途經(jīng)后，糖化bFGF對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用減弱；
　　4.流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明，HDMEC經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間糖化 bFGF干預(yù)后凋亡增加；阻斷RAGE途徑后，糖化bFGF的促凋亡能力下降；
　　5. Matrigel表明，糖化bFGF抑制HDMEC形成血管；阻斷RAGE途經(jīng)后，糖化bFGF抑血管化減弱。