南五味子“醋制入肝”炮制機(jī)理研究.pdf

1、目的:優(yōu)化南五味子醋制工藝，從體外化學(xué)成分實(shí)驗(yàn)結(jié)合血清藥物化學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)體內(nèi)外綜合評價(jià)，探究南五味子“醋制入肝”的炮制機(jī)理。
　　方法:1、醋制南五味子炮制工藝：以指紋圖譜為評價(jià)指標(biāo)，采用3因素3水平的Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，考察加醋量、悶潤時(shí)間、蒸制時(shí)間對南五味子醋制工藝的影響，優(yōu)化南五味子炮制工藝。
　　2、南五味子“醋制入肝”炮制原理研究：采用HPLC法分析南五味子醋制前后五味子酯甲、五味子甲素含量差異

2、，以及油水分配系數(shù)差異；采用3，5二硝基水楊酸比色法測定南五味子醋制前后不同化學(xué)部位所致α－淀粉酶抑制率的差異，篩選出抗α－淀粉酶活性部位；采用紫外分光光度法，測定南五味子炮制前后對DPPH吸光度的影響，考察南五味子炮制前后體外清除自由基能力；以CCl4致大鼠急性肝損傷為動(dòng)物模型，于造模后24h剖取肝組織，測定南五味子醋制前后給藥高、中、低劑量組肝組織中總抗氧化能力（T-AOC）變化情況；體內(nèi)外相結(jié)合綜合評價(jià)南五味子醋制前后抗氧化能力差

3、異。
　　3、醋制南五味子血清藥物化學(xué)研究：采用HPLC指紋圖譜法對比分析醋制前后南五味子有效物質(zhì)入血后的移行成分。
　　4、醋制南五味子藥代動(dòng)力學(xué)研究：炮制前給藥組和炮制后給藥組按給藥劑量給藥，于SD大鼠服藥后不同時(shí)間點(diǎn)分別采集血樣和肝組織樣本，用高效液相色譜儀測定，測得血藥濃度、肝勻漿濃度。計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，比較醋制南五味子相對于其生品而言的相對攝取率（Re）、峰濃度比（Ce）。
　　結(jié)果:1、通過回歸模型的預(yù)測

4、，得到醋制南五味子最佳炮制工藝條件為加醋量28.1%，悶潤時(shí)間1.95h，蒸制時(shí)間3.9h。
　　2、醋制后五味子酯甲、五味子甲素含量及油水分配系數(shù)均高于炮制前；南五味子炮制前后的乙酸乙酯提取部位對α－淀粉酶抑制作用最好，南五味子醋制后各化學(xué)部位對α－淀粉酶抑制率均大于炮制前；炮制后南五味子清除DPPH自由基的能力強(qiáng)于炮制前；五味子炮制前和炮制后各劑量組均能升高大鼠肝臟中T-AOC活性，但炮制后效果要明顯優(yōu)于炮制前。
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5、、通過南五味子提取物供試品、空白血漿和含藥血漿的對比，確定有14種血中移行成分，其中有6種為原型成分，剩下的8種為移行成分。
　　4、由藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)可知，醋制過程延長了五味子酯甲和五味子甲素在體內(nèi)的滯留時(shí)間，增大了Cmax。五味子酯甲和五味子甲素的Ce和Re均大于1，表明醋制炮制過程增強(qiáng)了五味子木脂素類成分的肝臟分布。
　　結(jié)論:本文通過實(shí)驗(yàn)研究表明，醋制過程可以增加南五味子有效成分含量，提高體內(nèi)外抗氧化能力，延長藥物在體