祛膜止崩乳膏治療子宮內(nèi)膜增生及安全性研究.pdf

1、目的：采用雌激素負(fù)荷法即隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇，建立子宮內(nèi)膜增生模型，觀察祛膜止崩乳膏對(duì)雌激素致大鼠、家兔子宮內(nèi)膜增生癥的祛膜效果和之后的修復(fù)情況，并對(duì)祛膜止崩乳膏的毒性及其使用過程中的安全性進(jìn)行探討研究。
　　 方法：(1)以不同的劑量隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇建立大鼠、家兔子宮內(nèi)膜增生模型，待模型成功后，麻醉，開腹，單側(cè)子宮內(nèi)給予不同劑量的祛膜止崩乳膏，在給藥后的不同時(shí)間點(diǎn)觀察該藥對(duì)大鼠、家兔子宮內(nèi)膜增生癥的祛膜效果和之后的

2、修復(fù)情況，以及對(duì)大鼠卵巢、宮頸、陰道的組織病理學(xué)影響，并與右側(cè)子宮做自身比較；(2)觀察小鼠灌胃高濃度的祛膜止崩乳膏所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)，測(cè)定LD50或最大給藥量，試驗(yàn)結(jié)束后取小鼠心、肝、脾、肺、腎及消化道進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，分析藥物毒性作用可能的靶器官和人誤服過量藥物時(shí)可能出現(xiàn)的急性中毒癥狀；(3)安全性研究：①豚鼠在重復(fù)接觸祛膜止崩乳膏后，觀察祛膜止崩乳膏作為致敏原引起的變態(tài)反應(yīng)在皮膚上的表現(xiàn)，按皮膚過敏反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，計(jì)算各組的

3、反應(yīng)平均值和致敏率，判定致敏反應(yīng)強(qiáng)度；②家兔進(jìn)行陰道給藥觀察祛膜止崩乳膏對(duì)家兔陰道粘膜的刺激性，按局部粘膜刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)評(píng)分；③祛膜止崩乳膏家兔皮膚給藥對(duì)完整皮膚和破損皮膚的刺激性作用，觀察給藥后1、24、48、72小時(shí)出現(xiàn)的紅斑和水腫等情況，進(jìn)行評(píng)分和評(píng)價(jià)皮膚刺激強(qiáng)度，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取給藥部位皮膚進(jìn)行組織病理學(xué)檢查；④取正常的雌性大鼠分組，麻醉后開腹單側(cè)子宮內(nèi)給藥，于給藥后不同時(shí)間點(diǎn)分別處理部分動(dòng)物，取其雙側(cè)卵巢、子宮、宮頸及陰

4、道，進(jìn)行病理學(xué)檢查，觀察祛膜止崩乳膏對(duì)大鼠正常子宮內(nèi)膜組織病理學(xué)檢查的影響；⑤將祛膜止崩乳膏局部涂抹在小鼠耳殼，20min后處死動(dòng)物，精密稱量左右耳殼重量，計(jì)算腫脹度。
　　 結(jié)果：(1)祛膜止崩乳膏子宮內(nèi)給藥對(duì)雌激素致子宮內(nèi)膜增生癥大鼠能使上皮細(xì)胞層脫落，內(nèi)膜變薄，并有廣泛的急性炎癥反應(yīng)，給藥側(cè)子宮重量大于未給藥側(cè)，此作用在給藥3天表現(xiàn)最突出，并呈濃度依賴性，藥后7天后逐漸恢復(fù)，上皮細(xì)胞修復(fù)，呈新生的柱狀上皮，炎性反應(yīng)逐漸減輕

5、，給藥21天后內(nèi)膜恢復(fù)，但有些上皮仍呈復(fù)層。祛膜止崩乳膏對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥大鼠宮頸、陰道和卵巢組織無顯著影響；祛膜止崩乳膏子宮內(nèi)給藥對(duì)雌激素致子宮內(nèi)膜增生癥家兔能使上皮細(xì)胞層脫落，內(nèi)膜變薄，并有廣泛的急性炎癥反應(yīng)，此作用在給藥3天表現(xiàn)最突出，并呈濃度依賴性。(2)祛膜止崩乳膏小鼠灌胃給藥具有嚴(yán)重的急性毒性反應(yīng)，表現(xiàn)為自主活動(dòng)減少，蜷縮，給藥40min后排尿增多，呼吸急促困難，肌肉顫抖，無力，對(duì)心、肝、脾、肺、腎等組織有嚴(yán)重的病理學(xué)損傷，小

6、鼠灌胃祛膜止崩乳膏40、32、25g/kg的死亡率分別為100％、50％和20％，祛膜止崩乳膏小鼠灌胃的LD50為30.20g/kg，95％可信限區(qū)間為33.05～27.59g/kg。(3)安全性試驗(yàn)：①祛膜止崩乳膏低濃度(臨床擬用制劑)無致敏性，高濃度能引起致敏接觸反應(yīng)，致敏率為20％；②祛膜止崩乳膏低濃度(臨床擬用制劑)組及高濃度組有對(duì)家兔陰道粘膜均為中度刺激性，平均刺激性反應(yīng)分值分別為1.75及2.5與對(duì)照組比較差異有顯著性意義；

7、③祛膜止崩乳膏高、低濃度組(臨床擬用制劑)對(duì)家兔完整皮膚和破損皮膚具有刺激性，能引起紅斑和水腫，在1小時(shí)～24小時(shí)較嚴(yán)重，72小時(shí)外觀上減輕，皮膚組織病理學(xué)檢查結(jié)果表明，祛膜止崩乳膏高、低濃度組家兔在給藥72小時(shí)后，完整皮膚鏡下可見不同程度的小灶性缺損、壞死或脫落，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，破損皮膚病理改變更明顯一些；④祛膜止崩乳膏高濃度組可使正常大鼠給藥側(cè)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞呈低柱狀，腺體數(shù)量較少，少數(shù)動(dòng)物內(nèi)膜上皮細(xì)胞部分脫落，少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，與未給藥

8、的對(duì)側(cè)子宮有顯著性差異；中濃度組給藥側(cè)內(nèi)膜上皮細(xì)胞有少數(shù)脫落，上皮細(xì)胞呈低柱狀，而對(duì)側(cè)上皮高柱狀，幾乎無脫落；低濃度組給藥側(cè)上皮部分脫落，腺體正常，與對(duì)側(cè)子宮無明顯差別；⑤祛膜止崩乳膏組小鼠耳殼腫脹度均大于對(duì)照組，祛膜止崩乳膏中、高濃度組與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P＜0.01)，但弱于二甲苯組。
　　 結(jié)論：祛膜止崩乳膏(臨床擬用制劑)子宮內(nèi)給藥對(duì)雌激素致子宮內(nèi)膜增生癥大鼠、家兔有祛除內(nèi)膜作用，對(duì)正常大鼠子宮內(nèi)膜也有祛膜作用；