電刺激骶神經(jīng)對(duì)脊髓損傷雄性大鼠生殖系統(tǒng)影響的研究.pdf

1、研究背景:
　　急性脊髓損傷(SCI)是脊柱外科的常見病多發(fā)病，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。損傷后不僅可以引起損傷平面下感覺運(yùn)動(dòng)功能障礙和大小便障礙，還可以導(dǎo)致生殖功能障礙，SCI導(dǎo)致的感覺運(yùn)動(dòng)功能障礙和大小便障礙在過去是學(xué)者們研究熱點(diǎn)，在治療方法上也取得一些進(jìn)展。但是對(duì)于SCI導(dǎo)致的生殖功能障礙研究似乎不那么熱門，很多報(bào)道存在一定矛盾，且沒有發(fā)現(xiàn)良好的治療方法。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)電刺激骶神經(jīng)能改善SCI后大小便功能障礙，本課題以急性SCI

2、大鼠為模型，電刺激雙側(cè)骶3神經(jīng)作為干預(yù)手段，初步觀察SCI和SCI后電刺激骶神經(jīng)對(duì)大鼠睪丸、附睪、前列腺、精子、下丘-垂體-性腺軸激素的影響，進(jìn)一步了解神經(jīng)因素在生殖系統(tǒng)中的作用，以期為臨床上治療脊髓損傷患者生殖功能障礙提供新的依據(jù)。
　　目的:
　　初步觀察SCI和SCI后電刺激骶3神經(jīng)對(duì)大鼠睪丸、附睪、前列腺重量和形態(tài)學(xué)的影響，對(duì)精子數(shù)量和質(zhì)量的影響，對(duì)下丘-垂體-性腺軸激素的影響，為臨床上治療脊髓損傷患者生殖功能障礙尋

3、找新的思路。
　　方法:
　　54只SD大鼠隨機(jī)分為三組，假手術(shù)對(duì)照組（SO組n=18）僅行椎旁肌剝離，脊髓損傷組（SCI組n=18）采用改良Allen's打擊法對(duì)胸10處脊髓進(jìn)行打擊，脊髓損傷電刺激組（SCIE組n=18）在改良Allen's打擊法打擊胸10脊髓基礎(chǔ)上，每天對(duì)雙側(cè)骶3神經(jīng)進(jìn)行連續(xù)2小時(shí)電刺激，刺激參數(shù)電壓3V，頻率20Hz，電流10mA，波寬200us，刺激時(shí)間為15s，間隔15s，刺激15m、休息15m。

4、于術(shù)后第2周、4周和6周分別處死每組大鼠各6只。
　　(1)測(cè)得各大鼠睪丸、附睪及前列腺重量，并取睪丸、附睪及前列腺標(biāo)本進(jìn)行切片和HE染色，行光鏡觀察，其中睪丸標(biāo)本加做電鏡切片及觀察。
　　(2)取附睪內(nèi)精子計(jì)數(shù)，按照WHO精子活動(dòng)能力分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，計(jì)算出精子的活動(dòng)率、不動(dòng)率、快速向前運(yùn)動(dòng)率，并對(duì)精子進(jìn)行鐵蘇木素染色，觀察精子形態(tài)。
　　(3)取眼眶后靜脈血，采用ELISA法檢測(cè)大鼠血清中促性腺激素釋放激素、卵泡刺

5、激素、黃體生成素、睪酮及雄激素結(jié)合蛋白含量。
　　應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理分析。對(duì)各組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)、同一時(shí)間點(diǎn)不同組間指標(biāo)比較采用ANOVA單因素方差分析。對(duì)于時(shí)間和處理兩種因素對(duì)各組間指標(biāo)的影響采用析因設(shè)計(jì)方差分析。以P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　(1)對(duì)器官重量的影響
　　(1.1)睪丸重量:SCI組睪丸重量在第2周和第4周無顯著改變，第6周時(shí)較對(duì)照組和SCIE組顯著降低(P＜0.05)

6、，而SCIE組各時(shí)間點(diǎn)睪丸重量無顯著改變。
　　(1.2)附睪重量:SCI組附睪重量在第4周呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，第6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)。SCIE組附睪重量在第6周雖有降低趨勢(shì)，但較對(duì)照組無顯著差異。
　　(1.3)前列腺重量:SCI組前列腺重量在第2、4周無顯著改變，第6周較對(duì)照組和SCIE組顯著增高(P＜0.05)，SCIE組各時(shí)間點(diǎn)前列腺重量較對(duì)照組無顯著差異。
　　(2)對(duì)器官形態(tài)學(xué)影響
　　(2

7、.1)對(duì)睪丸形態(tài)學(xué)影響:SCI組大鼠睪丸第2周開始光鏡下顯示生精細(xì)胞排列紊亂，管腔成熟精子減少，間質(zhì)水腫，Leydig細(xì)胞減少，隨時(shí)間推移，上述改變更加明顯，到第6周出現(xiàn)睪丸各類細(xì)胞大量壞死，管腔內(nèi)成熟精子明顯減少，間質(zhì)水腫消退。電鏡顯示SCI組生精細(xì)胞和精子細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡，第6周出現(xiàn)較多細(xì)胞壞死碎片。而SCIE組同時(shí)間點(diǎn)在光鏡和電鏡下睪丸生精細(xì)胞排列紊亂、間質(zhì)水腫、精子減少及細(xì)胞壞死程度均較SCI組輕。
　　(2.2)對(duì)前列腺形

8、態(tài)學(xué)影響:SCI組大鼠前列腺自第2周起出現(xiàn)腺上皮增生，腺腔萎縮，間質(zhì)增生，第4、6周上述改變更加明顯。而SCIE組同時(shí)間點(diǎn)前列腺腺上皮增生、腺腔萎縮、間質(zhì)增生程度均較SCI組輕。
　　(2.3)對(duì)附睪形態(tài)學(xué)影響:SCI組大鼠附睪在第2周出現(xiàn)間質(zhì)增生、水腫、炎細(xì)胞浸潤，管腔內(nèi)精子減少，第4、6周上述改變更明顯。而SCIE組同時(shí)間點(diǎn)附睪間質(zhì)增生、水腫、炎細(xì)胞浸潤和官腔精子減少程度較SCI組輕。
　　(3)對(duì)精子的影響
　　

9、(3.1)對(duì)精子數(shù)量的影響:SCI組精子數(shù)量在第2周無明顯減少，第4、6周較對(duì)照組顯著減少(P＜0.05)。SCIE組精子數(shù)量在第4、6周較對(duì)照組顯著減少(P＜0.05)，但較SCI組顯著升高(P＜0.05)。
　　(3.2)對(duì)精子質(zhì)量影響:SCI組精子活動(dòng)率及不動(dòng)率在第2周無明顯改變，活動(dòng)率在第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，不動(dòng)率則較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)。SCIE組精子活動(dòng)率及不動(dòng)率在第2、4周較對(duì)照組無明

10、顯改變，活動(dòng)率在第6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，較SCI組顯著升高(P＜0.05)，不動(dòng)率則較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)，較SCI組顯著降低(P＜0.05)。SCI組精子快速向前運(yùn)動(dòng)率在第2周無明顯改變，第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，SCIE組精子快速向前運(yùn)動(dòng)率在第2、4周無明顯改變，第6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，但較SCI組顯著升高(P＜0.05)。
　　(3.3)對(duì)精子形態(tài)學(xué)影響:SCI組精

11、子數(shù)量在第2周開始減少，少數(shù)精子尾部斷裂，第4周畸形精子增多，出現(xiàn)大頭精子、無尾精子，第6周更明顯。SCIE組第2周精子形態(tài)大致正常，數(shù)量稍減少，第4、6周出現(xiàn)畸形精子，精子數(shù)量進(jìn)一步減少，但程度較SCI組輕。
　　(4)對(duì)下丘-垂體-性腺軸激素的影響
　　(4.1)對(duì)促性腺激素釋放激素(GnRH)的影響:SCI組和SCIE組第2周GnRH均無顯著改變。SCI組GnRH在第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，SCIE組

12、GnRH在第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，但較SCI組顯著升高(P＜0.05)。
　　(4.2)對(duì)黃體生成素(LH)的影響:SCI組第2、4、6周LH較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)。SCIE組LH在第2周無顯著改變，在第4、6周較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)，但較SCI組顯著降低(P＜0.05)。
　　(4.3)對(duì)卵泡刺激素(FSH)的影響:SCI組第2、4、6周FSH較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)。SCI

13、E組FSH在第2、4周無顯著改變，在第6周較對(duì)照組顯著升高(P＜0.05)，但較SCI組顯著降低(P＜0.05)。
　　(4.4)對(duì)睪酮(T)的影響:SCI組T在第2周無顯著改變，第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)。SCIE組T在第2周無顯著改變，在第4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，在第6周較SCI組顯著升高(P＜0.05)。
　　(4.5)對(duì)雄激素結(jié)合蛋白(ABP)的影響:SCI組第2、4、6周ABP較對(duì)

14、照組顯著降低(P＜0.05)。SCIE組ABP在第2、4、6周較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，但在第4、6周較SCI組顯著升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1) SCI急性期會(huì)導(dǎo)致雄性大鼠睪丸生精細(xì)胞壞死，精子數(shù)量和質(zhì)量降低，附睪間質(zhì)增生、水腫，前列腺間質(zhì)增生，腺上皮增生，腺腔萎縮，使睪丸、附睪重量減輕，前列腺重量增加。使GnRH、T和ABP降低，使LH和FSH升高。
　　(2)電刺激骶3神經(jīng)能抑制SCI急性