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文檔簡(jiǎn)介
1、前言:
結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connec tivetissue growth factor,CTGF)是1991年由Bradham等首次在人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的條件培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)的,CTGF屬即刻早期基因CCN家族的一員,是由即刻早期基因編碼的基質(zhì)相關(guān)的分泌性蛋白,在血管形成和腫瘤的生長(zhǎng)中起各種不同的作用。CCN蛋白家族有共同的分子結(jié)構(gòu),能調(diào)節(jié)各種細(xì)胞的功能,如調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂、趨化性、細(xì)胞凋亡、附著、能動(dòng)性、血管生成、離子運(yùn)輸?shù)取?/p>
2、近來,研究發(fā)現(xiàn)CTGF的表達(dá)與某些腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展有關(guān),越來越多的證據(jù)顯示,CTGF可以調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲、血管生成和凋亡。
本研究觀察CTGF在人體某些皮膚惡性腫瘤等組織中的表達(dá)情況,并以正常皮膚組織作為對(duì)照,初步分析CTGF在上述皮膚病中可能的作用。
材料和方法:
一、研究對(duì)象
1、病例組臨床資料完整的鱗狀細(xì)胞癌(BCC)組織、基底細(xì)胞癌(SCC)組織各18例,全部來自中國(guó)
3、醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科。
2、對(duì)照組正常皮膚組織14例,全部來自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院整形外科,無系統(tǒng)性疾病或其它皮膚病。
二、材料
1、兔抗人CTGF多克隆抗體
2、即用型SABC免疫組化試劑盒
3、3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色系統(tǒng)
三、實(shí)驗(yàn)方法
制備5u厚石蠟切片。抗原高壓熱修復(fù)。先后滴加兔抗人多克隆抗CTGF一抗,BSA封閉液
4、、生物素化羊抗兔IgG和SABC,PBS作陰性對(duì)照。DAB顯色,蘇木素復(fù)染。脫水、透明、封片。光鏡下觀察。
四、結(jié)果判定
光鏡下(×400倍),每張切片隨機(jī)選取4個(gè)視野,以細(xì)胞膜或胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性。采用半定量積分法,對(duì)細(xì)胞中陽性細(xì)胞的染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行人工判定;顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像,分析陽性表達(dá)面密度和積分光密度值,取平均值,獲得每例標(biāo)本陽性染色的面密度和積分光密度值。
5、 五、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS16.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。分類資料采用X2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用LSD-t檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)果:
1、18例BCC組織中,15例呈高表達(dá),3例弱表達(dá),百分率為83.33%;18例SCC中,14例呈高表達(dá),4例弱表達(dá),百分率為77.78%;14例正常皮膚有2例弱表達(dá)。
2、BCC、SCC陽性表達(dá)分布情況均與對(duì)照組織(正常皮膚)有統(tǒng)計(jì)
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