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1、目的: 本課題旨在從理論上闡明“毒邪”是抗精子抗體產(chǎn)生的病因病機(jī),采用同種異體人工主動(dòng)免疫法建立雌性大鼠抗精子抗體陽性動(dòng)物模型,觀察赤黃平陽湯對(duì)模型大鼠的抗精子抗體吸光度(OD)值、妊娠率、胚胎數(shù)、各臟器重量及子宮、卵巢組織學(xué)的影響,證實(shí)以清熱解毒、涼血活血組方的赤黃平陽湯對(duì)抗精子抗體陽性的抑制作用,從而為臨床的廣泛應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。 方法: 本實(shí)驗(yàn)選用2-3 月齡SD雌鼠 50 只,從中隨機(jī)取10只作為正常對(duì)照
2、組,余 40 只大鼠雙側(cè)腹股溝皮下淋巴結(jié)周圍注射抗原進(jìn)行免疫,最多經(jīng)5次免疫后,所有大鼠血清AsAb為陽性。將40只抗精子抗體陽性大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為:模型組、赤黃平陽湯組、知柏地黃湯組、醋酸潑尼松組,其中正常組及模型組灌服生理鹽水,余治療組分別灌胃給藥。兩周后,各治療組雌鼠眶內(nèi)靜脈叢取血,離心取血清,標(biāo)記后保存,酶聯(lián)免疫法(ELISA)統(tǒng)一測(cè)定抗精子抗體吸光度(OD)值。同時(shí),以雄與雌為1/3比例配對(duì)合籠,于妊娠第 18天,斷頭
3、處死雌鼠,數(shù)胚胎數(shù)及計(jì)算各組受孕率。同時(shí)解剖各雌鼠,對(duì)肝,脾及雙腎分別稱重并進(jìn)行記錄。處死雌鼠前再一次檢測(cè)抗精子抗體吸光度(OD)值。所有雌鼠子宮及卵巢甲醛固定,包埋,切片,觀察子宮內(nèi)膜及卵巢的組織學(xué)變化。 結(jié)果: 1.藥物對(duì)各組大鼠AsAbOD值的影響:免疫5次后,40只雌鼠AsAbOD為陽性,提示造模成功。且各組AsAbOD值比較無差異;合籠前與模型組比較,醋酸潑尼松組與赤黃平陽湯組均可以明顯降低血清AsAbOD值(
4、P<0.01),但兩者相比無差異。合籠約 20 天后,與模型組比較,各藥物組均表現(xiàn)出降低 AsAbOD值作用(P<0.01),三組比較,赤黃平陽湯組優(yōu)于知柏地黃湯組與醋酸潑尼松組(P<0.05)。 2.各組的受孕率及平均胚胎數(shù)比較:赤黃平陽湯組,知柏地黃湯組及醋酸潑尼松組各自受孕率分別為80%,70%,50%,均大于模型組的受孕率 40%,擬做行×列表資料的 X<'2>檢驗(yàn),但由于本實(shí)驗(yàn)的樣本例數(shù)較少,選用四格表的確切概率法統(tǒng)計(jì)
5、,各組受孕率比較無差異。模型組胚胎數(shù)明顯降低,與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明抗精子抗體陽性模型雌鼠確實(shí)能降低其胚胎數(shù),而赤黃平陽湯組能增加胚胎數(shù),且與模型組比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性意義(P<0.05),知柏地黃湯組及醋酸強(qiáng)地松組也能增加胚胎數(shù),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.各組間器官重量比較,其中模型組、醋酸潑尼松組脾臟的重量與正常對(duì)照組比較有明顯減輕(P<0.05,P<0.01)。腎臟與肝臟重量各組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
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