周期性壓力培養(yǎng)對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及基質(zhì)金屬蛋白酶-2的影響.pdf

1、目的:研究周期性壓力培養(yǎng)對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）增殖活性及基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase2，MMP-2）的影響，探索影響B(tài)MSCs增殖的最佳力學(xué)參數(shù)，達(dá)到大量擴(kuò)增的目的。 方法:密度梯度離心法分離培養(yǎng)新西蘭大白兔BMSCs，取生長(zhǎng)良好的第3代細(xì)胞，按4×104個(gè)/孔接種于6孔板，設(shè)立5組：5.32 kPa，10.

2、64 kPa，21.28 kPa，29.26 kPa（1 kPa=7.5 mmHg）壓力組、對(duì)照組（正常大氣壓培養(yǎng)）。分別給予對(duì)應(yīng)的壓力培養(yǎng)，每日加壓6h×3 d；正常培養(yǎng)組細(xì)胞只接受正常大氣壓刺激，不予額外加壓。通過(guò)四甲基偶氮唑（MTT）比色試驗(yàn)，流式細(xì)胞儀（flow cytometer，F(xiàn)CM）鑒定細(xì)胞表面抗原陽(yáng)性表達(dá)及檢測(cè)細(xì)胞增殖周期，同時(shí)收集培養(yǎng)液作MMP-2質(zhì)量濃度檢測(cè)。觀察不同周期性壓力對(duì)BMSCs增殖及MMP-2的影響。

3、 結(jié)果:6 h/d壓力干預(yù)BMSCs，3d后細(xì)胞形態(tài)無(wú)異常變化，呈集落樣生長(zhǎng)。隨著壓力的增加，細(xì)胞吸光度值逐漸升高，以21.28 kPa壓力組最高，但升高至29.26kPa壓力時(shí)吸光度值明顯降低（F=3.731，P＝0.008）。與正常培養(yǎng)組比較，5.32，10.64，21.28 kPa壓力組細(xì)胞周期發(fā)生改變，增殖指數(shù)（proliferation index，PI）均明顯升高（P<0.05或0.01），但29.26 kPa壓力組P