黃芪注射液的工藝及初步穩(wěn)定性研究.pdf

1、研究背景： 黃芪注射液具有調(diào)節(jié)免疫、抗炎、降壓、養(yǎng)心通脈等多種功效，臨床主用于病毒性心肌炎、心功能不全及病毒性肝炎等疾病的治療。目前，市售的黃芪注射液為小容量注射液，可肌內(nèi)注射，也可靜脈滴注，規(guī)格為每支2mL，相當于原藥材4g，或每支10mL，相當于原藥材20g，沿用的是中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑(WS3-B-3335-98)。 目前，黃芪注射液在臨床上主要是以靜脈滴注的形式使用。由于現(xiàn)有的黃芪注射液為小容

2、量劑型，實際使用時需將其添加于大容量注射液中，從而稀釋成靜脈滴注用的大容量黃芪注射液，使用不方便，且容易造成污染。在臨床使用中，由醫(yī)護人員直接往大容量注射液中添加黃芪注射液，給操作帶來了很多的不便和麻煩，也增加了帶進異物(如玻璃屑等)的可能性。而且該添加配液過程一般是暴露在空氣中進行的，這已經(jīng)成為大容量黃芪注射液的外源性污染源之一。另外因黃芪注射液和其他大容量注射液之間因pH值差異和溶解性、穩(wěn)定應等因素而析出的不溶性微粒，因其不易被肉眼

3、察覺，常對人體造成多種危害，中草藥的抗原性微粒還可引起變態(tài)反應。 由于大容量注射劑型在實際使用中無論是在微粒控制，還是有關(guān)物質(zhì)的控制及各相關(guān)藥液穩(wěn)定性指標都有高于小容量注射劑型要求的嚴格控制標準。因此，本實驗室研制了大容量靜脈滴注用黃芪注射液，以克服現(xiàn)有產(chǎn)品存在的缺陷，滿足臨床用藥的需求。 目的： 選取黃芪甲苷為指標成分，優(yōu)選黃芪粗提取工藝，改進提取液的精制方法，確定黃芪注射液的最佳制備工藝路線；建立可靠易行的指

4、標成分含量測定方法；對成品進行初步穩(wěn)定性考察，以確保制備出的黃芪注射液質(zhì)量可控、穩(wěn)定性良好，為藥效研究及臨床應用提供依據(jù)。 方法： 1.采用正交設(shè)計方法，以20g黃芪藥材提取液中黃芪甲苷的含量為評價指標，考察浸泡時間、提取次數(shù)、溶劑用量3個因素對黃芪水提取效率的影響，黃芪甲苷含量用HPLC-ELSD法測定。 2.比較水提法與醇提法對有效成分黃芪甲苷提取率的影響，分別測定提取液中黃芪甲苷的含量，采用獨立樣本t檢驗的

5、方法對測量結(jié)果進行分析。 3.改進黃芪粗提液的精制方法，采用AB-8大孔吸附樹脂對醇沉過的黃芪提取液進行處理，確定最佳裝柱量和乙醇洗脫的最佳濃度。 4.參照《中國藥典》2005年版和部頒標準的規(guī)定，建立高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法(HPLC-ELSD)測定黃芪注射液中黃芪甲苷含量的方法。 5.通過比較外觀性狀、pH值、黃芪甲苷含量等指標，考察室溫條件下成品注射液在第0、1、2、3、6、12個月的穩(wěn)定性。

6、 結(jié)果： 1.黃芪水提取工藝的最佳條件為：浸泡24h，提取2次，每次加8倍量水。 2.水提法和醇提法得到的樣品中黃芪甲苷的含量無顯著性差異。 3.當固定上樣量為40mL黃芪提取液(每1mL相當于0.5g黃芪藥材)時，AB-8大孔樹脂的最佳裝柱量為25cm(約20g樹脂)，乙醇最佳洗脫濃度為80％。 4.黃芪注射液的成品為黃色或淡棕黃色澄明液體，薄層掃描法鑒別2批供試品的色譜中，在與黃芪甲苷對照品色譜相應的

7、位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點。 5.HPLC-ELSD法測定黃芪甲苷含量，在選定的色譜條件下，當黃芪甲苷的進樣量在0.396～3.168μg范圍內(nèi)時線性關(guān)系良好(r=0.9998，n=8)，平均回收率為98.09％，RSD為2.52％。 6.在室溫下放置保存3批樣品，穩(wěn)定性考察的各項指標在6個月內(nèi)符合部頒質(zhì)量標準的規(guī)定。 結(jié)論： 1.黃芪注射液的最佳制備

8、工藝路線為：藥材浸泡24h，水煎2次(每次1h)，每次加8倍量水，合并煎液，離心，過濾，濾液濃縮至每1mL相當于1g藥材，用乙醇沉淀處理2次(第1次乙醇含量達75％，第2次乙醇含量達85％)，棄去沉淀，過濾，回收乙醇并調(diào)節(jié)濃度至每1mL相當于0.5g藥材，上AB-8樹脂柱，分別用2倍量的蒸餾水和0.1％氫氧化鈉溶液洗滌樹脂柱，棄去洗脫液，再用2倍量的80％乙醇洗脫樹脂柱，收集洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮至每1mL相當于10g黃芪藥材，用注

9、射用水稀釋至每1mL相當于1g黃芪藥材，冷藏放置12h,濾過，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5，煮沸，加入0.125％的活性炭，煮沸5min，趁熱過濾，加注射用水稀釋至適量，再用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5，精濾，灌封，滅菌。 2.HPLC-ELSD法可用于測定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量，該法簡便易行，準確可靠，是定量黃芪甲苷成分的新型有效的分析方法，可作為黃芪及其制劑的質(zhì)量控制方法。 3.按照以上工藝制備