苦黃注射液與谷紅注射液多組分測(cè)定及成品輸液的穩(wěn)定性研究.pdf

1、靜脈輸注中藥注射液引發(fā)的不良事件屢有發(fā)生，中藥注射液中的成分復(fù)雜，不穩(wěn)定性因素較多，需建立同時(shí)測(cè)定多種有效成分的方法對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制；隨著各三甲醫(yī)院靜脈用藥調(diào)配中心集中配液工作的有效開(kāi)展，中藥注射液處于舉足輕重的地位，為探討其從配置到輸注過(guò)程中質(zhì)量的變化，需研究室內(nèi)光照對(duì)中藥注射液成品輸液穩(wěn)定性的影響以指導(dǎo)臨床合理用藥、減少不良事件的發(fā)生。
　　苦黃注射液是由苦參、大黃、茵陳蒿、柴胡和大青葉經(jīng)加工制成的純中藥復(fù)方靜脈注射液，具有清

2、熱利濕、疏肝退黃的功效。谷紅注射液是由乙酰谷酰胺與紅花提取液組成的中西藥復(fù)方制劑，二者聯(lián)合能協(xié)同保護(hù)腦缺血損害、抵抗慢性缺氧、改善認(rèn)知功能。本研究建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)分別同時(shí)測(cè)定苦黃注射液中4個(gè)組分的7種有效成分的含量、谷紅注射液中2個(gè)組分的7種有效成分的含量，分別建立苦黃注射液3種溶媒配伍、谷紅注射液4種溶媒配伍的成品輸液的穩(wěn)定性研究方法。本研究能快速、高效、精確、全面對(duì)苦黃注射液與谷紅注射液進(jìn)行質(zhì)量

3、控制，能科學(xué)、客觀、準(zhǔn)確分析室內(nèi)光照對(duì)成品輸液穩(wěn)定性影響的關(guān)鍵指標(biāo)，為臨床合理、安全、有效用藥提供有意義的參考依據(jù)。
　　第一部分：UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定苦黃注射液中7種有效成分
　　目的：建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定苦黃注射液中苦參堿、槐果堿、大黃素、大黃酸、綠原酸、柴胡皂苷a、蘆薈大黃素含量的方法。
　　方法：采用 Phenomenex Kinetex C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，5μm）

4、，柱溫20℃；以甲醇-0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫，流速為0.5 mL/min，進(jìn)樣量5μL；采用電噴霧離子源進(jìn)行正負(fù)離子模式監(jiān)測(cè)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）用于定量分析，源噴射電壓為5500 V、?4500 V，離子源溫度為600℃?？鄥A、槐果堿、大黃素、大黃酸、綠原酸、柴胡皂苷a、蘆薈大黃素的檢測(cè)離子對(duì)分別為249.2/148.1，247.2/136.1，269.0/225.0，283.1/239.0，353.2/190.9，

5、825.5/779.4，271.1/225.0。
　　結(jié)果：在10 min內(nèi)苦黃注射液中7種有效成分完全分離；峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系（r≥0.9973）；檢測(cè)限和定量限分別小于1.528、3.055 ng/mL；日內(nèi)精密度RSD（%）分別為1.04~2.98（n=6），日間精密度RSD（%）分別為1.33~2.91（n=6），表明該方法精密度良好；12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好；試驗(yàn)重復(fù)性良好；加樣回收率為95.20%~104.0%。

6、
　　結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、快速、高效，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，適用于同時(shí)測(cè)定苦黃注射液中苦參堿、槐果堿、大黃素、大黃酸、綠原酸、柴胡皂苷a、蘆薈大黃素7種有效成分，為該制劑建立更全面的質(zhì)量控制方法提供依據(jù)。
　　第二部分：UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定谷紅注射液中7種有效成分
　　目的：建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定谷紅注射液中乙酰谷酰胺、羥基紅花黃色素A、蘆丁、紫丁香苷、山奈素、山奈酚、槲皮素含量的方法。
　　方法：

7、采用 Phenomenex Kinetex C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，5μm），柱溫20℃；以乙腈-0.1%甲酸水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫，流速為0.5 mL/min，進(jìn)樣量5μL；采用電噴霧離子源進(jìn)行正負(fù)離子模式監(jiān)測(cè)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）用于定量分析，源噴射電壓為5500 V、?4500 V，離子源溫度為600℃。乙酰谷酰胺、羥基紅花黃色素A、山奈素、山奈酚、槲皮素、蘆丁、紫丁香苷的檢測(cè)離子對(duì)分別為186.9/144.8

8、、611.3/491.2、299.1/283.9、285.0/117.0、301.1/150.9、609.2/300.1、609.2/300.1。
　　結(jié)果：在7 min內(nèi)谷紅注射液中7種有效成分完全分離；峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系（r≥0.9988）；檢測(cè)限和定量限分別小于0.18、0.6 ng/mL；日內(nèi)精密度RSD（%）分別為1.45~3.81（n=6），日間精密度RSD（%）分別為0.81~3.67（n=6）；12 h內(nèi)

9、穩(wěn)定性良好；試驗(yàn)重復(fù)性良好；加樣回收率為95.3%~104.1%。
　　結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便快速，且靈敏度高、專屬性強(qiáng)，適用于同時(shí)測(cè)定谷紅注射液中乙酰谷酰胺、羥基紅花黃色素A、蘆丁、紫丁香苷、山奈素、山奈酚、槲皮素7種有效成分，為全面建立該制劑的質(zhì)量控制方法提供可靠依據(jù)。
　　第三部分：苦黃注射液成品輸液的穩(wěn)定性研究
　　目的：考察苦黃注射液最大劑量、最小劑量與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、果糖注射液配伍后的成品輸

10、液于室溫下放置48 h的穩(wěn)定性及室內(nèi)光照對(duì)成品輸液的影響。
　　方法：苦黃注射液按最大劑量、最小劑量與3種溶媒配伍后，分為室內(nèi)光照組與遮光組，考察各成品輸液于室溫下放置48 h內(nèi)的溶液外觀、不溶性微粒、pH、苦參堿和槐果堿的含量變化，其中外觀、不溶性微粒按2015版《中國(guó)藥典》第四部通則項(xiàng)下特性檢查法進(jìn)行檢測(cè)，苦參堿和槐果堿含量采用高效液相色譜法（HPLC-UV）測(cè)定。
　　結(jié)果：結(jié)果各成品輸液在48 h均澄清，無(wú)明顯渾濁、

11、沉淀產(chǎn)生，顏色無(wú)明顯變化，為深黃色澄清溶液；低濃度室內(nèi)光照組的10%葡萄糖注射液的成品輸液pH在6 h顯著升高，遮光組較室內(nèi)光照組穩(wěn)定，果糖注射液的成品輸液呈弱酸性；高濃度組中果糖注射液的成品輸液24 h后的微粒值不符合規(guī)定，其余組的微粒值48 h內(nèi)符合規(guī)定；各成品輸液中的苦參堿含量基本保持不變，槐果堿含量逐漸降低，遮光組較室內(nèi)光照組穩(wěn)定。
　　結(jié)論：果糖注射液不適合作為苦黃注射液的溶媒，成品輸液由配制到輸注遮光較穩(wěn)定，且應(yīng)盡早使

12、用以減少有效成分的降解。
　　第四部分：谷紅注射液成品輸液的穩(wěn)定性研究
　　目的：建立HPLC-UV法同時(shí)測(cè)定谷紅注射液中4種有效成分（乙酰谷酰胺、羥基紅花黃色素A、紫丁香苷、腺苷），考察常規(guī)劑量谷紅注射液與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%NaCl注射液、果糖注射液配伍后的成品輸液室溫下放置48 h的穩(wěn)定性及室內(nèi)光照對(duì)成品輸液的影響；考察重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）超劑量用藥的合理性。
　　方法：采用HPLC-U

13、V法同時(shí)測(cè)定4種有效成分；常規(guī)劑量谷紅注射液與4種溶媒配伍后，分為室內(nèi)光照組與遮光組，考察各成品輸液于室溫下放置48 h內(nèi)的溶液外觀、不溶性微粒、pH、4種有效成分含量變化；考察超劑量谷紅注射液與2種常用溶媒配伍后的成品輸液在室內(nèi)光照下于室溫（約25℃）放置24 h內(nèi)以上4個(gè)指標(biāo)變化情況。
　　結(jié)果：各常規(guī)劑量成品輸液在48 h均澄清，無(wú)明顯渾濁、沉淀產(chǎn)生，顏色無(wú)明顯變化；與0.9%NaCl注射液配伍后的成品輸液在0 h不溶性微粒