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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)測(cè)量瘢痕及自身正常皮膚厚度及應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)各組瘢痕及正常組織中P物質(zhì)、P物質(zhì)受體,希望通過(guò)研究組織中P物質(zhì)、P物質(zhì)受體含量及其與瘢痕增生指數(shù)之間的關(guān)系,初步探討P物質(zhì)及其受體刺激瘢痕增生的機(jī)制,為研究瘢痕的預(yù)防和治療,提供理論依據(jù)。
方法:
1.隨機(jī)抽取河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院整形科瘢痕切除術(shù)患者24例:其中非增生性瘢痕9例,增生性瘢痕11例,瘢痕疙瘩4例,男女各半,年齡10歲至56歲。每例患者均
2、完整切取瘢痕,并切取適量周?chē)Fつw,固定、修整、脫水、石蠟包埋標(biāo)本,以游標(biāo)卡尺測(cè)量石蠟標(biāo)本皮膚組織的厚度,計(jì)算瘢痕的增生指數(shù)=瘢痕厚度.正常皮膚厚度/正常皮膚厚度,單位:mm。
2.對(duì)標(biāo)本進(jìn)行組織切片,厚度為5μm,對(duì)組織中的P物質(zhì)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,蘇木素復(fù)染細(xì)胞核,脫水封片,并進(jìn)行圖像采集,測(cè)定各標(biāo)本灰度值。
3.對(duì)標(biāo)本進(jìn)行組織切片,厚度為5μm,對(duì)組織中的P物質(zhì)受體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,蘇木素復(fù)染細(xì)
3、胞核,脫水封片,并進(jìn)行圖像采集,測(cè)定各標(biāo)本的灰度值。
4.應(yīng)用sas9統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)各組間的增生指數(shù)、灰度值進(jìn)行方差分析;增生指數(shù)與瘢痕灰度值進(jìn)行直線(xiàn)回歸分析。
結(jié)果:
1.非增生性瘢痕組、增生性瘢痕組、瘢痕疙瘩組的平均增生指數(shù)分別為:-0.025233863,1.802332415,1.618440657。
2.光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察可見(jiàn):自身對(duì)照組皮膚結(jié)構(gòu)基本正常,真皮纖維排列整齊,平
4、行排列,可見(jiàn)正常腺體結(jié)構(gòu),真皮乳頭均勻分布,曲線(xiàn)平滑,P物質(zhì)及P物質(zhì)受體主要分布于表皮基底層及真皮乳頭層,神經(jīng)纖維及腺體周?chē)部梢?jiàn)著色;非增生性瘢痕全層結(jié)構(gòu)均較正常萎縮,腺體稍減少,纖維結(jié)構(gòu)平行,排列欠整齊,P物質(zhì)及P物質(zhì)受體主要著色于表皮基底層;增生性瘢痕真皮層明顯增厚,腺體減少,纖維結(jié)構(gòu)排列紊亂,呈交錯(cuò)排列,真皮乳頭曲線(xiàn)變平;瘢痕疙瘩真皮層纖維結(jié)構(gòu)紊亂,可見(jiàn)多量漩渦結(jié)構(gòu),偶可見(jiàn)腺體結(jié)構(gòu)真皮乳頭層結(jié)構(gòu)紊亂,曲線(xiàn)加深,并可見(jiàn)環(huán)狀結(jié)構(gòu),真
5、皮乳頭下大量肥大細(xì)胞浸潤(rùn),增生性瘢痕和瘢痕疙瘩P物質(zhì)及P物質(zhì)主要著色于表皮基底層,纖維結(jié)構(gòu)間隙及殘存腺體也可見(jiàn)P物質(zhì)表達(dá),成纖維細(xì)胞可見(jiàn)P物質(zhì)受體表達(dá)。
3.非增生性瘢痕組、增生性瘢痕組、瘢痕疙瘩組中瘢痕的P物質(zhì)免疫組化圖像分析平均灰度分別為:101.2667,131.9636,132.325,P物質(zhì)受體免疫組化染色圖像分析平均灰度分別為:96.2358,130.6271,132.352;非增生性瘢痕組、增生性瘢痕組、瘢痕
6、疙瘩組中正常皮膚P物質(zhì)免疫組化圖像分析平均灰度值分別為:109.0556,122.2182,126.95,P物質(zhì)受體免疫組化染色圖像分析平均灰度分別為:110.1362,121.5738,124.3571。應(yīng)用SAS9統(tǒng)計(jì)軟件分析,瘢痕組中非增生性瘢痕與增生性瘢痕和瘢痕疙瘩之間P物質(zhì)及P物質(zhì)受體含量存在差異,增生性瘢痕與瘢痕疙瘩之間無(wú)顯著性差異;正常皮膚各組之間P物質(zhì)及P物質(zhì)受體含量均無(wú)顯著差異。配對(duì)t檢驗(yàn)顯示各組瘢痕與正常皮膚之間P物
7、質(zhì)及P物質(zhì)受體圖像分析結(jié)果均存在顯著差異,其中非增生性瘢痕組瘢痕中P物質(zhì)圖像分析灰度值低于正常皮膚,t=-4.05,P=0.00185,P物質(zhì)受體圖像分析灰度值也低于正常皮膚,t=-4.5,P=0.001,增生性瘢痕組瘢痕中P物質(zhì)圖像分析灰度值均高于正常皮膚,t=7.02.P<0.001;增生性瘢痕組瘢痕中P物質(zhì)受體圖像分析灰度值均高于正常皮膚,t=6.93,P<0.001:瘢痕疙瘩組瘢痕中P物質(zhì)圖像分析灰度值均高于正常皮膚,t=3.5
8、8,P=0.01865;瘢痕疙瘩組瘢痕中P物質(zhì)受體圖像分析灰度值均高于正常皮膚,t=4.54,P=0.01。
4.應(yīng)用SAS9統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)非增生性瘢痕組、增生性瘢痕組、瘢痕疙瘩組三組所有數(shù)據(jù)的瘢痕增生指數(shù)與瘢痕P物質(zhì)圖像分析灰度值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析(表6),結(jié)果顯示不存在線(xiàn)性關(guān)系,其散點(diǎn)圖見(jiàn)圖11;對(duì)非增生性瘢痕組的增生指數(shù)與瘢痕P物質(zhì)圖像分析灰度值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析(表7),結(jié)果顯示存在直線(xiàn)關(guān)系,回歸方程為:y1=-0.1
9、973+0.0017x1,F(xiàn)=65.14,P=0.0002,其散點(diǎn)圖見(jiàn)圖12;對(duì)病理性瘢痕(即增生性瘢痕組與瘢痕疙瘩組合并)的增生指數(shù)與瘢痕P物質(zhì)圖像分析灰度值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析(表8),結(jié)果顯示存在直線(xiàn)關(guān)系,回歸方程為:y2=-22.8784+0.1855x2,F(xiàn)=250,P<0.0001(圖13)。
結(jié)論:
1.P物質(zhì)是通過(guò)刺激真皮層成纖維細(xì)胞和肥大細(xì)胞上的P物質(zhì)受體,實(shí)現(xiàn)其促進(jìn)瘢痕增生的作用的。
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