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1、目的:對(duì)不同時(shí)期增生期瘢痕成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)基因cyclinD1、P16ink4A及蛋白的表達(dá)與同時(shí)期成纖維細(xì)胞所處的細(xì)胞周期的相關(guān)性進(jìn)行探討,探討細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)基因cyclinD1、P16ink4A在增生性瘢痕演變中的作用,為今后對(duì)增生性瘢痕進(jìn)行周期的干預(yù)及基因治療提供前期理論依據(jù)。 方法:以手術(shù)切取后低溫保存的32例增生性瘢痕組織為材料,根據(jù)臨床診斷及瘢痕形成的時(shí)間分為四個(gè)階段:3個(gè)月,六個(gè)月,一年及兩年的增生性
2、瘢痕,利用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù),觀察不同階段增生性瘢痕中p16及cyclinD1的mRNA表達(dá)情況,用蛋白電泳(Western Blot)技術(shù)觀察二者的蛋白表達(dá)水平,以及用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各個(gè)階段增生性瘢痕中成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期情況。 結(jié)果:1.隨著HS的發(fā)展,成纖維細(xì)胞中p16及cyclinD1的強(qiáng)度明顯呈由強(qiáng)至弱的變化,不同階段增生性瘢痕中p16及cyclinD1的mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)趨勢(shì)一致:3個(gè)月組表
3、達(dá)最強(qiáng),其次6個(gè)月,1年組,2年組均呈現(xiàn)低表達(dá)。3個(gè)月組與6個(gè)月組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),3個(gè)月組、6個(gè)月組分別與1年組、2年組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。1年組與2年組比較,差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2.3個(gè)月、6個(gè)月HS中成纖維細(xì)胞大部分處于S期,1年,2年HS中成纖維細(xì)胞大部分處于G0/G1期. 結(jié)論:1.增生性瘢痕早期存在細(xì)胞周期調(diào)控因子cyclinD1,P16的表達(dá)異常,可能是增生
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