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1、目的:通過(guò)建立大鼠頰粘膜缺損模型,觀察不同納米結(jié)構(gòu)的絲素蛋白支架(SF)的生物相容性,將其與目前臨床上廣泛應(yīng)用的異種脫細(xì)胞基質(zhì)(牛皮脫細(xì)胞基質(zhì))進(jìn)行對(duì)比,評(píng)估其作為組織工程化口腔粘膜支架材料的可行性,為絲素蛋白修復(fù)口腔粘膜缺損提供理論依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)方法:將80只雄性Wister大鼠隨機(jī)分五組各16只,并建立口腔粘膜缺損模型。A組為修復(fù)口腔頰粘膜圓形缺損(直徑10mm)的納米絲素蛋白組(直徑100nm);B組為修復(fù)口腔頰粘膜圓形缺
2、損(直徑10mm)的納米絲素蛋白組(直徑200nm);C組為修復(fù)口腔頰粘膜圓形缺損(直徑10mm)的納米絲素蛋白組(直徑500nm);D組為修復(fù)口腔頰粘膜圓形缺損(直徑10mm)的牛皮脫細(xì)基質(zhì)組;E組為凡士林紗布覆蓋的口腔頰粘膜圓形缺損(直徑10mm)的對(duì)照組。口腔粘膜缺損模型建立后,對(duì)五組大鼠術(shù)后每周行大體觀察、組織學(xué)及免疫組化觀察,并記錄結(jié)果,將所有獲得的數(shù)據(jù)采用SPSS11.9統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。
結(jié)果:1、大體觀察:
3、術(shù)后創(chuàng)面均無(wú)明顯感染,術(shù)后第一周A、B、C、D組受植區(qū)可見(jiàn)透明膜狀物(四種生物材料),E組創(chuàng)緣略有紅腫;術(shù)后一周時(shí)創(chuàng)面收縮速率D組>C組>B組>A組>E組;術(shù)后兩周時(shí)創(chuàng)面收縮速率為E組>D組>B組>A組>C組;術(shù)后三周時(shí)創(chuàng)面收縮速率為E組>D組>B組>A組>C組;術(shù)后四周時(shí)創(chuàng)面收縮速率為E組>B組>D組>A組>C組。
2、組織學(xué)和免疫組化:對(duì)照組(E組)的炎性細(xì)胞密度在任何時(shí)間點(diǎn)均大于其余各實(shí)驗(yàn)組。術(shù)后第一周時(shí)五組的炎癥細(xì)胞數(shù)
4、均達(dá)到最高峰,在隨后三周逐步遞減。五組在術(shù)后一、二、三、四周時(shí)成纖維數(shù)量均呈現(xiàn)逐漸增多趨勢(shì),A、B、C、D四組在術(shù)后一、二、三周時(shí)毛細(xì)血管數(shù)量呈現(xiàn)出逐漸增多趨勢(shì),E組在術(shù)后一、二、三、四周時(shí)陽(yáng)性血管數(shù)呈現(xiàn)一直增加趨勢(shì),術(shù)后兩周時(shí)可見(jiàn)毛細(xì)血管,而小血管則在術(shù)后三周時(shí)可見(jiàn)。術(shù)后一周時(shí)五組均可見(jiàn)上皮結(jié)構(gòu),術(shù)后二、三、四周時(shí)可見(jiàn)各組創(chuàng)面的新生上皮細(xì)胞逐漸增加,在A、B、C和D組中表現(xiàn)為新生上皮增厚并呈多層結(jié)構(gòu),上皮腳和釘突增多,上皮多層結(jié)構(gòu)逐漸
5、恢復(fù)極向,E組中的上皮層較薄且上皮釘突形成較少。另一方面,在A、B、C和D組中CK的表達(dá)均高于E組。術(shù)后一周時(shí)絲素蛋白組(A、B、C組)創(chuàng)面絲素蛋白材料排列較為整齊,術(shù)后兩周時(shí)絲素蛋白牛皮脫細(xì)胞基質(zhì)已幾近完全降解,而絲素蛋白多孔結(jié)構(gòu)僅有部分降解。
結(jié)論:1、納米纖維絲素蛋白材料在大鼠口腔粘膜缺損創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中可起到與目前臨床上應(yīng)用于口腔粘膜缺損修復(fù)的材料異種(牛皮)脫細(xì)胞基質(zhì)材料相近的效果,可以用作口腔粘膜缺損的修復(fù)材料,具有
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