去細(xì)胞異種神經(jīng)復(fù)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)神經(jīng)缺損的實驗研究.pdf

1、目的：探討AXN復(fù)合BMSCs構(gòu)建組織工程神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的效果。 方法：體外培養(yǎng)大鼠BMSCs，與AXN復(fù)合構(gòu)建TEN；雌性Wistar大鼠60只，隨機分為3組，每組20只，建立右坐骨神經(jīng)10mm缺損修復(fù)模型。A組：BMSCs與AXN復(fù)合構(gòu)建TEN橋接神經(jīng)缺損；B組：單純AXN橋接神經(jīng)缺損；C組：自體神經(jīng)移植組。術(shù)后4w、12w依次進(jìn)行干細(xì)胞的轉(zhuǎn)歸、TEN的移植免疫、神經(jīng)電生理檢測、再生神經(jīng)組織學(xué)觀察、小腿三頭肌肌纖維橫徑

2、等檢測判斷坐骨神經(jīng)缺損修復(fù)情況。 結(jié)果：1.成功的進(jìn)行了BMSCs的體外培養(yǎng)和BrdU標(biāo)記，初始標(biāo)記率88.36％，免疫組化染色和流式細(xì)胞儀檢測培養(yǎng)細(xì)胞表型CD44(+)、CD90(+)和CD34(-)。2.AXN與新鮮神經(jīng)相比較細(xì)胞和髓鞘被徹底清除，保持了原有的三維仿生結(jié)構(gòu)，免疫原成份被清除，流式細(xì)胞儀MHCII檢測結(jié)果顯示AXN免疫原性明顯減弱。3.術(shù)后4w，流式細(xì)胞儀檢測外周血CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞百分比三組間

3、無統(tǒng)計學(xué)差異，取移植段切片熒光顯微鏡下可見再生纖維束狀排列，只有A組S-100表達(dá)陽性細(xì)胞其細(xì)胞核內(nèi)有BrdU陽性表達(dá)，B、C組均無表達(dá)；術(shù)后12w神經(jīng)電生理檢測顯示，刺激可以通過移植段神經(jīng)到達(dá)遠(yuǎn)端的效應(yīng)器，在神經(jīng)支配區(qū)肌肉可以記錄到運動誘發(fā)電位，跨過移植神經(jīng)段的傳導(dǎo)速度，A、C組無統(tǒng)計學(xué)差異，A、B和B、C組有統(tǒng)計學(xué)差異；組織形態(tài)學(xué)觀察顯示再生的神經(jīng)纖維通過遠(yuǎn)端吻合口，A、C組較B組排列整齊，軸突粗大、致密，移植段內(nèi)有縱行排列分布的S