去細(xì)胞異種肌腱復(fù)合IGF-Ⅰ修復(fù)肌腱缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探索用化學(xué)去細(xì)胞異種肌腱復(fù)合胰島素樣生長(zhǎng)因子I(IGF-Ⅰ)修復(fù)肌腱缺損的可行性提供理論依據(jù)，為化學(xué)去細(xì)胞異種肌腱作為肌腱組織工程的細(xì)胞生長(zhǎng)支架提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：切取月齡(6個(gè)月)相同Leghorn雞屈趾肌腱經(jīng)化學(xué)去細(xì)胞處理后作為異種肌腱移植供體，去細(xì)胞前后行生物力學(xué)、組織學(xué)光鏡電鏡觀察；健康成熟日本大耳白兔54只，建立雙后肢跟腱中間束2cm缺損模型，隨機(jī)分為3組，每組18只。實(shí)驗(yàn)組為去細(xì)胞異種肌腱復(fù)合IGF-Ⅰ移

2、植組(A組)、對(duì)照組Ⅰ為自體肌腱移植組(B組)、對(duì)照組Ⅱ?yàn)閱渭內(nèi)ゼ?xì)胞異種肌腱移植組(C組)。肌腱移植縫合用4-0無創(chuàng)傷肌腱縫合線行雙“8”字縫合，兩邊各加強(qiáng)一針，術(shù)后伸直位管型石膏固定2周，每日A組左右交替臀肌注射濃度為300ng/ml的IGF-Ⅰ一次，每次1ml，連續(xù)兩周，B、C兩組以同樣方式注射等量的生理鹽水。術(shù)前3天10只兔及術(shù)后第3、7、14天每組10只兔取耳緣靜脈血行血常規(guī)檢測(cè)；2、4、9周每組取6只兔對(duì)標(biāo)本行大體觀察、生物力

3、學(xué)測(cè)定、組織學(xué)光鏡、電鏡觀察及圖像分析。結(jié)果：1.去細(xì)胞前后生物力學(xué)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，去細(xì)胞后的最大抗拉力是去細(xì)胞前的83.44％，去細(xì)胞前可見細(xì)胞與膠原纖維交替緊密排列，去細(xì)胞后膠原排列相對(duì)松散，且無細(xì)胞及細(xì)胞碎片。2.在相同時(shí)期內(nèi)，A、B、C三組血常規(guī)白細(xì)胞數(shù)兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.肌腱移植后總體上經(jīng)歷了細(xì)胞長(zhǎng)入、膠原纖維再生、替代和再塑形的過程；早期成纖維細(xì)胞增生活躍，胞體和胞核較大，形態(tài)

4、呈圓形或橢圓形，膠原合成增加，膠原纖維早期以纖細(xì)纖維為主，且排列較紊亂，以后成纖維細(xì)胞逐漸分化為成熟的腱細(xì)胞，數(shù)量逐漸減少，細(xì)胞形態(tài)演變?yōu)殚L(zhǎng)梭形；隨時(shí)間延長(zhǎng)，粗細(xì)不等的膠原纖維經(jīng)改造塑形變?yōu)榇旨?xì)相等的較粗大纖維，排列方向趨向平行，在結(jié)構(gòu)和功能上逐漸達(dá)到正常腱水平。從細(xì)胞分化速度來看，A、B兩組細(xì)胞增值、分化及成熟較C組快，尤以A組更甚。4.術(shù)后相同時(shí)間內(nèi)三組膠原纖維含量?jī)蓛杀容^，A、B組與C組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，A組與

5、B組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5.術(shù)后相同時(shí)間內(nèi)三組生物力學(xué)兩兩比較，A組與B組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，A、B組與C組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，術(shù)后2周時(shí)肌腱最大抗拉力最差，9周時(shí)A、B兩組最大抗拉力接近正常水平。結(jié)論：1.化學(xué)去細(xì)胞肌腱可明顯降低其免疫原性，移植后無明顯的免疫排斥反應(yīng)發(fā)生，其力學(xué)強(qiáng)度亦能滿足肌腱移植的需要。2.化學(xué)去細(xì)胞異種肌腱復(fù)合IGI—Ⅰ修復(fù)肌腱缺損的效果優(yōu)于單純化學(xué)去細(xì)胞異種肌腱