羊膜包裹同種異體肌腱移植修復雞趾屈肌腱缺損的實驗研究.pdf

1、目的:肌腱損傷是手外科領域較為常見的疾病,多為多發(fā)性外傷,常常需要肌腱移植修復缺損。同種異體肌腱因其來源充足,不會對患者造成副損傷,是理想的移植選擇。羊膜為半透明薄膜,異體移植后不發(fā)生免疫排斥反應,且可分泌免疫抑制因子,抑制移植后炎性反應的發(fā)生。本次試驗是利用羊膜包裹在同種異體肌腱周圍,移植修復來亨雞趾深屈肌腱缺損,評價其促進內(nèi)源性愈合情況,預防肌腱粘連及抑制免疫排斥反應的有效性,為臨床手外科領域同種異體移植肌腱,預防肌腱的粘連提供理論

2、依據(jù)。
　　 方法:
　　 選用3個月月齡健康雄性來亨雞96只,平均1.95±0.063kg。編號、標記后隨機分為A組(羊膜同種異體肌腱包裹組)、B組(同種異體肌腱組)、C組(空白對照組)。本實驗選用來亨雞左足第Ⅲ、Ⅳ趾為肌腱損傷模型趾。于足趾跖側(cè)面近側(cè)指間關節(jié)到末節(jié)趾骨中段作“[”皮膚切口,長約3cm。切開皮膚,向側(cè)方翻起皮瓣,銳性分離,暴露屈趾淺、深肌腱組織。于趾間關節(jié)伸直位,趾淺屈肌腱近側(cè)腱系帶的止點遠測3mm處及

3、其向遠端1.5cm處兩點銳性橫斷趾深屈肌腱。A、B兩組每只來亨雞取下的Ⅲ、Ⅳ趾深屈肌腱段進行一對一互換,仔細縫合肌腱。A組植入2.0cm×1.5cm面積的羊膜小片,環(huán)形包繞移植肌腱及其上下吻合端;B組單純移植同種異體肌腱;C組在相同部位橫斷趾深屈肌腱后再縫合。術后來亨雞第Ⅲ、Ⅳ趾手術部位敷料包扎,踝關節(jié)跖屈、跖趾關節(jié)屈曲為90°、趾間關節(jié)伸直位石膏托、膠布固定。
　　 大體解剖觀察:術后7d、14d、21d、28d在A組、B組、

4、C組分別取6只來亨雞,處死后立即沿原手術切口切開,觀察腱周組織的病理性改變,移植的肌腱在吻合口處有無斷裂,移植肌腱的色澤,肌腱的滑動性,肌腱愈合及粘連的情況。
　　 組織學觀察:術后7d、21d在A組、B組、C組選取2只來亨雞,原手術切口切開足趾,仔細沿腱鞘淺層及骨面銳性切取以兩端肌腱吻合口中點為中心、長約2.0cm的趾深屈肌腱段。10％福爾馬林固定,乙醇梯度脫水,二甲苯透明處理后浸蠟包埋、切片,分別進行HE和Masson染色,

5、光鏡下觀察。
　　 透射電鏡觀察:術后14d、28d在A組、B組、C組選取2只來亨雞沿原手術切口切開足趾,自趾深屈肌腱兩端吻合部取1mm×1mm×1mm組織塊,3％戊二醛固定液及1％鋨酸固定液逐步固定,在溫度為2℃的冰箱內(nèi)以乙醇、丙酮梯度脫水,將組織塊用丙酮和812環(huán)氧樹脂包埋,固化后超薄切片機切片,3％醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙重染色,置透射電鏡下進行觀察。
　　 生物力學測定:術后7d、14d、21d、28d、35d、42d

6、每組取4只動物處死后,切取左足Ⅲ、Ⅳ趾的趾深屈肌腱行生物力學測試。①肌腱抗張斷裂強度的測定:取出第Ⅲ趾趾深屈肌腱段,固定于生物力學試驗機夾具上,滿載荷量程設定為200N,以15mm/min的拉伸速度進行牽拉至肌腱吻合口處斷裂,電腦運行測定程序并與試驗機相連,同步測量并記錄肌腱抗張斷裂強度數(shù)據(jù)。②拉斷肌腱粘連帶功耗的測定:第Ⅳ趾將其自跖趾關節(jié)處離斷,暴露出近端的趾深屈肌腱。在不影響其趾間關節(jié)活動下,固定住第Ⅳ趾的近節(jié)趾骨,肌腱固定在試驗機

7、夾具上進行牽拉,拉伸速度為15mm/min,滿載荷量程設定為200N。肌腱滑動14.5mm后停止,得到拉力一位移曲線,曲線下的面積為功耗W1。恢復后再次牽拉14.5mm,得到功耗W2。拉斷肌腱粘連帶功耗(設定為W0):W0=W1-W2.數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　 結(jié)果:
　　 ①大體和組織學觀察:術后7d、14d、21d、28d結(jié)果顯示C組較A組、B組充血、水腫及炎性反應小,炎性細胞的浸潤范圍更加局限。A、B組比較,A組

8、的組織充血、水腫及炎癥反應和侵潤范圍要弱于B組,膠原纖維的寬度及排列整齊性明顯強于B組。術后21d、28d可見A組腱周粘連疏松,B、C組腱周粘連致密。
　　 ②透視電鏡觀察:術后14d、28d結(jié)果顯示C組成纖維細胞合成較A、B組旺盛,可見大量排列較規(guī)則的膠原纖維。A組成纖維細胞數(shù)量較B組多,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富,新生的膠原纖維排列整齊、緊湊、粗大。
　　 ③生物力學測定:(一)肌腱抗張斷裂強度:術后各時間點,A、B組與C組比較

9、,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);術后7d、14d,A、B組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。其余各時間點A、B組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(二)拉斷粘連帶功耗:術后各時間點,A組與B、C組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);術后28d、35d、42d,B、C組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。其余各時間點B、C組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 羊膜做