TGF—β合并同種異體肌腱重建兔前交叉韌帶的實驗研究.pdf

1、背景與目的 前交叉韌帶(ACL)損傷是常見的運動損傷。隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展，熱衷運動人群的增多，該病的發(fā)病率有逐年增高的趨勢。由于ACL損傷后可引起膝關節(jié)不穩(wěn)定，有導致骨性關節(jié)炎的可能。同時它缺乏自我愈合的能力，所以這種疾病的治療方法以手術重建為主。目前手術重建所采用的韌帶移植物可大致分為自體肌腱，異體肌腱和人工肌腱或組織工程肌腱三種。由于自體肌腱的有限性和引起取腱部位的并發(fā)癥，如膝前區(qū)疼痛、膝關節(jié)不穩(wěn)定、下跪困難等的可能性，不適

2、用于重建韌帶的翻修或者高水平的運動員。人工肌腱可以短期內恢復病人的運動水平，但是價格昂貴，適應癥狹窄，有引起慢性滑膜炎的危險，而且遠期療效尚不明確。組織工程肌腱技術尚不成熟，尚停留在試驗階段。隨著人們意識的提高，消毒方法的改進，提供較多的無免疫排斥反應、無感染危險的同種移植物成為可能。同種異體肌腱成為重建ACL的比較理想的選擇。肌腱移植后的愈合過程，關系到術后病人康復計劃，遠期的療效，甚至重建的成敗。近年來，生物學、生物力學、生物化學和

3、細胞生物學研究飛速進展，各種現(xiàn)代實驗生物技術與方法滲透到肌腱愈合過程的研究中。對于自體肌腱重建后的愈合過程，國內外學者作了大量的研究。但是對于同種異體肌腱的愈合過程國內外報道不多。本論文旨在研究深低溫冷凍同種異體肌腱移植重建ACL關節(jié)外懸吊固定術后肌腱在骨隧道中的愈合過程，以及轉化生長因子β(TGF-β)對愈合過程的影響，為手術治療和術后康復提供依據(jù)。同時為促進愈合過程提供新的思路。 材料與方法新西蘭大白兔36只，體重2.2～2

4、.6kg，平均20月齡。隨機分為三組，每組12只動物24個后膝關節(jié)。第一組為自體肌腱移植對照組(C)，行自體伸趾長肌腱重建前交叉韌帶。第二、三組均取伸趾長肌腱，然后分組別按照二步深低溫冷凍法保存二周，然后重建ACL。第三組肌腱復溫后作為移植物重建第二組動物ACL，作為實驗對照組(T)。第二組肌腱復溫后與生長因子TGF-β復合后重建第三組動物ACL，作為實驗組(E)。分別于手術后第4、6、8周空氣栓塞法處死動物取材，每組4只共8個膝關節(jié)。

5、先行大體觀察。然后每組分別各取3個膝關節(jié)去除膝周軟組織后10％中性甲醛固定，EDTA脫鈣，然后做HE染色，Masson染色以觀察骨隧道與肌腱移植物界面之間愈合情況。其余5個膝關節(jié)做生物力學測試，測量韌帶的最大拔出力。 結果 1．術后各時間段動物膝關節(jié)內大體觀察無明顯積液，半月板無明顯磨損及退變。關節(jié)軟骨無明顯軟化及磨損。移植肌腱關節(jié)內部分無明顯松馳，各組移植肌腱關節(jié)內部分無明顯壞死，肌腱為白色，異體移植肌腱顏色較暗?？梢?/p>

6、滑膜包裹。骨隧道內移植肌腱未見明顯組織壞死。各組關節(jié)線處愈合較差。隧道內口處光滑。 2．隨取材組織時間延長，HE、Masson切片鏡下觀察顯示骨隧道一肌腱間隙中膠原組織呈增多趨勢。自體肌腱于六周時大致愈合。八周時形成間斷骨小梁樣組織。異體肌腱于八周左右愈合。添加因子的異體肌腱愈合過程優(yōu)于單純異體肌腱的重建。但是比自體肌腱移植稍差。八周時也可看見骨小梁樣組織。 3．二步深低溫冷凍處理的同種異體肌腱移植后可以看到肌腱組織的松

7、散。有裂解、壞死，再血管化過程。推測可能與愈合過程較差有關。 4．生物力學檢測結果使用SPSS 10.0軟件分析。各組別間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。添加細胞因子TGF-β后的同種異體肌腱力學特性優(yōu)于單純同種異體肌腱重建組，但是弱于自體肌腱重建。 結論 1．二步深低溫冷凍法是安全可靠的處理和保存同種異體肌腱的方法，但經(jīng)該方法處理后的同種異體肌腱移植有結構松散的現(xiàn)象，推測可能與術后生物力學數(shù)據(jù)表現(xiàn)差有關。