生物鐘基因Bmall、Per2在兒童急性淋巴細胞白血病的表達及意義.pdf

1、研究背景：
　　急性淋巴細胞白血病(acute lymphoid leukemia，ALL)是兒童時期最常見的血液腫瘤，占兒童白血病的70％左右，目前發(fā)病機制尚不明確。而有研究發(fā)現(xiàn)控制生物節(jié)律的內(nèi)在生物鐘基因表達異常與腫瘤的發(fā)生相關，在急慢性髓系白血病及非霍奇金淋巴瘤中都有檢測到鐘基因表達異常?，F(xiàn)有關鐘基因表達與急性淋巴細胞白血病發(fā)病關系的研究較少見。
　　研究目的：
　　通過對急性淋巴細胞白血病患兒生物鐘基因Bmal

2、1、Per2基因表達的檢測，探討生物鐘基因在兒童急性淋巴細胞白血病中的表達，初步揭示鐘基因在急性淋巴細胞白血病發(fā)病中的作用。
　　研究對象和方法：
　　1.選擇鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒童血液科ALL初診未治療患兒30例為實驗組1（ALL初治組），ALL化療完全緩解患兒30例為實驗組2（ALL-CR組），體檢中心體檢兒童30例為健康對照組。實驗組入選標準參照2006年“兒童急性淋巴細胞白血病診療建議（第3次修訂草案）”診斷分型標

3、準，實驗組和對照組均排除肥胖、心血管疾病、腫瘤及睡眠周期紊亂等影響鐘基因表達的疾病。
　　2.于晨06:00用無菌注射器分別抽取實驗組和對照組空腹靜脈血各2ml，并迅速打入EDTA抗凝管中，輕輕搖勻。
　　3.應用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞，吸取白膜層。
　　4.按照Trizol試劑說明書提取外周血單個核細胞總RNA，檢測RNA的純度及完整性;應用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成eDNA;采用Real-time PCR測定Bm

4、al1 mRNA、Per2 mRNA的表達。
　　結(jié)果：
　　1.ALL初治組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達與健康對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，ALL初治組患兒Per2 mRNA表達量水平均較對照組減低，Bmal1 mRNA表達水平均較健康對照組增高。
　　2.ALL-CR組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達與健康對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，ALL-CR組

5、Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達均較健康對照組減低。
　　3.ALL-CR組患兒Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達與ALL初治組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，ALL-CR組Bmal1 mRNA、Per2 mRNA表達均較ALL初治組減低。
　　結(jié)論：
　　1.在兒童ALL外周血單個核細胞中存在生物鐘基因Bmal1 mRNA、Per2 mRNA異常表達，表明其可能在兒童ALL的發(fā)生、發(fā)展中