混合嵌合體在異種心臟移植產(chǎn)生免疫耐受作用中的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁
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1、目的:通過非清髓方法建立豚鼠到大鼠混合嵌合體模型,進(jìn)行豚鼠到大鼠腹部心臟移植,研究混合嵌合體的形成對(duì)受體內(nèi)相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響,探討異種心臟移植免疫耐受機(jī)制。 方法:SD大鼠(受體),雌性18只隨機(jī)分為3組:所有受體大鼠接受60Coγ射線全身照射;并行環(huán)磷酰胺預(yù)處理,在照射后4小時(shí)內(nèi)經(jīng)尾靜脈輸注液體0.8ml。A組輸注豚鼠骨髓細(xì)胞;B組輸注豚鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;C組輸注生理鹽水。用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞移植后受體內(nèi)IFN-γ

2、和IL-4、IL.10細(xì)胞因子的表達(dá),并行各組供受體的體外單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(MLR)實(shí)驗(yàn)及嵌合體的測(cè)定。在成功建立嵌合體的基礎(chǔ)上,利用靜脈注射CVF干預(yù)超急性排斥反應(yīng)(HAR),行豚鼠到大鼠腹部異位心臟移植。在心臟移植后觀察、記錄各組移植心臟的存活時(shí)間和病理變化。 結(jié)果:A、B組動(dòng)物接受60Coγ射線全身照射后行豚鼠BMC/BM-MSCs移植,經(jīng)環(huán)磷酰胺預(yù)處理,在約21天后檢測(cè)嵌合現(xiàn)象,A組嵌合率明顯高于B組(P<0.05)

3、。A、B兩組中IFN-y、IL-4、IL-10細(xì)胞因子的表達(dá)水平一開始均較預(yù)處理前略有升高,但隨后下降恢復(fù)至正常水平。MLR實(shí)驗(yàn)證明耐受大鼠的免疫應(yīng)答反應(yīng)降低。心臟移植后A組受體病理表現(xiàn)為超急性排斥反應(yīng),Acw組心臟存活時(shí)間為358±42分鐘,較CcvF組(317±50分鐘)和D組(174-5分鐘)的存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P<0.05)。 結(jié)論:(1)非清髓性方案預(yù)處理后行供體骨髓細(xì)胞(BMC)/骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC

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