大B細(xì)胞淋巴瘤基因異常改變的臨床意義.pdf

1、目的:彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是一種最常見(jiàn)的大B細(xì)胞性非霍奇金淋巴瘤，由于基因表達(dá)的多樣性，使其在治療反應(yīng)及預(yù)后等方面存在顯著差異。粘膜相關(guān)淋巴組織結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤（MALT淋巴瘤）是另一種較為常見(jiàn)的B細(xì)胞淋巴瘤，在形態(tài)學(xué)上按照腫瘤組織內(nèi)大細(xì)胞數(shù)量的多少及分布方式的不同，可分為MALT淋巴瘤無(wú)大細(xì)胞轉(zhuǎn)化、MALT淋巴瘤伴有大細(xì)胞轉(zhuǎn)化及DLBCL伴有MALT淋巴瘤成分三種類型。由于在形態(tài)學(xué)上缺乏明確的診斷標(biāo)準(zhǔn)，使其難以準(zhǔn)確

2、區(qū)分。并且，目前對(duì)MALT淋巴瘤無(wú)大細(xì)胞轉(zhuǎn)化與MALT淋巴瘤伴有大細(xì)胞轉(zhuǎn)化這兩種類型的預(yù)后差異也不十分清楚。本課題將分別研究DLBCL及MALT淋巴瘤這兩種常見(jiàn)的B細(xì)胞淋巴瘤中基因異常改變的狀態(tài)，尋找DLBCL有效的分子預(yù)后標(biāo)志物，為發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù);尋找有助于鑒別不同類型MALT淋巴瘤的分子標(biāo)志物，并分析其預(yù)后意義，旨在合理指導(dǎo)臨床治療。
　　方法:
　　第一部分:采用高通量多重連接探針擴(kuò)增(MLPA)技術(shù)檢測(cè)

3、81例DLBCL中MYD88 L265P突變、CDKN2A、CDKN2B及p53基因缺失、BCL2及MDM2基因擴(kuò)增狀態(tài);采用熒光原位雜交(FISH)與免疫組化(IHC)技術(shù)檢測(cè)293例DLBCL中C-MYC基因易位狀態(tài)及C-MYC蛋白表達(dá)水平，分析兩者的相關(guān)性，并對(duì)其中116例臨床、病理及隨訪資料完整者進(jìn)行生存分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各基因異常改變與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系，分析各臨床病理因素與預(yù)后的相關(guān)性。
　　第二部分:采用FISH及I

4、HC技術(shù)，研究20例伴有大細(xì)胞轉(zhuǎn)化與42例無(wú)大細(xì)胞轉(zhuǎn)化的MALT淋巴瘤及7例DLBCL伴有MALT淋巴瘤成分的病例中C-MYC基因易位狀態(tài)及C-MYC蛋白表達(dá)水平，分析它們?cè)贛ALT淋巴瘤大細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程中的作用及預(yù)后價(jià)值。
　　結(jié)果:
　　第一部分:
　　1、MLPA實(shí)驗(yàn)組中，MYD88 L265P突變率為19.8％，CDKN2A、CDKN2B與p53基因缺失率分別為21.0％、14.8％與16.0％，BCL2與MDM

5、2基因擴(kuò)增率均為16.0％，且BCL2基因擴(kuò)增多見(jiàn)于Ann Arbor分期Ⅰ-Ⅱ期者(P=0.027)，p53基因缺失多見(jiàn)于年齡大者(P=0.001)，MDM2基因擴(kuò)增多見(jiàn)于生發(fā)中心B細(xì)胞(GCB)亞型者(P=0.007)。單因素分析顯示，MYD88 L265P突變者總體生存率及無(wú)進(jìn)展生存率低(P=0.035及P=0.004)，BCL2基因擴(kuò)增者總體生存率及無(wú)進(jìn)展生存率高(P=0.011及P=0.026);在利妥昔單抗治療組中，MYD8

6、8 L265P突變型者的總體生存期及無(wú)進(jìn)展生存期短（P=0.032及P=0.003）;在非生發(fā)中心B細(xì)胞(non-GCB)亞型組中，MYD88 L265P突變型組的無(wú)進(jìn)展生存率低(P=0.018)，BCL2基因擴(kuò)增者的總體生存期及無(wú)進(jìn)展生存期長(zhǎng)(均為P=0.007)。多因素分析顯示，MYD88 L265P突變是影響DLBCL預(yù)后及復(fù)發(fā)和（或）進(jìn)展的獨(dú)立因子（分別為HR=2.498,95％CI:1.128-5.533, P=0.024;

7、HR=2.578,95％CI:1.303-5.102, P=0.007)。
　　2、293例DLBCL中，10.2％發(fā)生了C-MYC基因易位，22.9％C-MYC蛋白陽(yáng)性表達(dá)，且C-MYC基因易位多見(jiàn)于GCB亞型者。單因素分析顯示，C-MYC蛋白陽(yáng)性者總體生存率低(P=0.010);在GCB亞型組中，C-MYC蛋白陽(yáng)性者的總體生存率低（P=0.005）;在利妥昔單抗治療組及non-GCB亞型組中，C-MYC基因易位者總體生存率低（

8、分別為P=0.046及P=0.022）。多因素分析顯示C-MYC蛋白陽(yáng)性者總體生存時(shí)間短，是影響DLBCL預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(HR=1.995，95％CI:1.032-3.854，P=0.040)。
　　3、整合所有數(shù)據(jù)資料的81例DLBCL的Cox多因素回歸模型分析表明，IPI、血清LDH水平、治療方案及中樞神經(jīng)系統(tǒng)受侵狀態(tài)是影響DLBCL總體生存率及無(wú)進(jìn)展生存率的獨(dú)立因素，而MYD88 L265P突變是影響DLBCL復(fù)發(fā)和（或

9、）進(jìn)展的獨(dú)立指標(biāo)（HR=2.578，95％CI:1.303-5.102，P=0.007）。
　　第二部分:伴有大細(xì)胞轉(zhuǎn)化的MALT淋巴瘤多發(fā)生于胃外或胃腸道外。C-MYC蛋白在MALT淋巴瘤伴有大細(xì)胞轉(zhuǎn)化組中的陽(yáng)性率為75％，顯著高于無(wú)大細(xì)胞轉(zhuǎn)化組(35.7％，P=0.004)，且C-MYC蛋白陽(yáng)性者多見(jiàn)于胃外MALT淋巴瘤(P=0.001)。62例MALT淋巴瘤均未發(fā)生C-MYC基因易位，僅1例DLBCL伴有MALT淋巴瘤成分者

10、伴有C-MYC基因易位。單因素分析顯示，C-MYC蛋白表達(dá)水平、IPI、Ann Arbor分期、血清LDH水平與MALT淋巴瘤總體生存率有關(guān)。多因素分析則表明，C-MYC蛋白≥20％是MALT預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)論:DLBCL中發(fā)生了多種基因的異常改變。MYD88 L265P突變是影響DLBCL復(fù)發(fā)和（或）轉(zhuǎn)移的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可能將成為DLBCL新的治療靶點(diǎn)。C-MYC蛋白在MALT淋巴瘤伴大細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程中發(fā)揮了重要作