血必凈注射液對(duì)膿毒癥大鼠急性肺損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本研究通過建立膿毒癥(sepsis)大鼠急性肺損傷模型,觀察肺臟病理學(xué)變化、核因子kappa B(NF-kB)的表達(dá)及血清活化蛋白C(APC)和腫瘤壞死因子-α(TNF-V)濃度的變化,通過觀察血必凈注射液對(duì)血清APC和TNF-α肺臟組織NF—kB表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討膿毒癥肺損傷的病理生理機(jī)制及血必凈注射液的治療作用。
　　 方法:健康成年Spragne-Dawley(SD)大鼠136只,雌雄各半,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照

2、組(A組)24只、假手術(shù)組(B組)24只、膿毒癥組(C組)44只、血必凈治療組(D組)44只。本實(shí)驗(yàn)采用盲腸結(jié)扎穿孔法(CLP)制作膿毒癥大鼠模型。每組動(dòng)物按照時(shí)間點(diǎn)分為6、24、48、72小時(shí)4個(gè)亞組。D組于術(shù)后0小時(shí)和每隔12小時(shí)經(jīng)尾靜脈注射血必凈注射液8ml/kg,B組和C組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)經(jīng)尾靜脈注射等量生理鹽水。在CLP術(shù)畢開始計(jì)時(shí),于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)將動(dòng)物麻醉后,經(jīng)腹主動(dòng)脈采血測(cè)定血清TNF-α和APC水平,取右肺下葉行蘇木素-伊紅(

3、HE)染色觀察病理形態(tài)學(xué)變化,免疫組化檢測(cè)NF—kB的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1術(shù)后一般情況的觀察:B組大鼠蘇醒較早,剖腹未見惡臭、腹腔水腫及腸管壞死等表現(xiàn)。C組大鼠術(shù)后均有嚴(yán)重的膿毒癥表現(xiàn):蘇醒延遲,逐漸出現(xiàn)精神萎靡,豎毛及呼吸困難等表現(xiàn),剖腹可見惡臭味血性滲液,腸管水腫粘連,盲腸壞死變黑。D組大鼠與C組相比,臨床表現(xiàn)明顯減輕。
　　 2病理觀察:A組肺組織結(jié)構(gòu)完整,肺泡間隔無水腫和充血,肺泡腔無炎性細(xì)胞浸

4、潤。B組與A組無明顯差異。C組可見肺泡腔充血、纖維蛋白滲出,肺泡腔內(nèi)可見中性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等大量炎性細(xì)胞浸潤,血管、氣管周圍有不同程度的間質(zhì)充血,水腫和肺大皰形成,24小時(shí)達(dá)頂峰,其后無緩解趨勢(shì)。D組也出現(xiàn)了上述表現(xiàn),但程度減輕。
　　 3 APC測(cè)定:C組于CLP6小時(shí)后血清APC含量開始下降,與A組、B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著時(shí)間延長,APC含量呈逐漸下降趨勢(shì)。D組于6小時(shí)后,較C組升高,差異有

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05):在24和48小時(shí)與C組比較差異不再有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但依然有升高趨勢(shì)。D組血清APC含量在各時(shí)間點(diǎn)均較A組、B組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 4 TNF-α測(cè)定:C組血清TNF-α濃度于CLP后6-72小時(shí)逐漸升高,與A組、B組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。D組血清TNF-α濃度在各時(shí)間點(diǎn)均顯著降低,與C組相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。D組各時(shí)間點(diǎn)血清TNF-α濃

6、度均較A組、B組升高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 5肺組織NF-kB表達(dá):A、B組偶見NF-kB陽性細(xì)胞； C組于術(shù)后6小時(shí)可以觀察到NF-κB表達(dá),48小時(shí)達(dá)高峰,并持續(xù)到72小時(shí),C組表達(dá)量與A組、B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。D組表達(dá)量在相同時(shí)間點(diǎn)均低于C組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；D組表達(dá)量在各時(shí)間點(diǎn)均高于A組、B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 6大鼠死亡情況

7、:A組與B組大鼠72小時(shí)內(nèi)無死亡。C組大鼠44只中共死亡13只(病死率29.55％),D組44只中共死亡5只(病死率11.36％)。C組病死率較D組升高,二者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(X2=4.47,P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1 CLP法能夠成功復(fù)制大鼠膿毒癥模型。
　　 2膿毒癥大鼠血清TNF-α水平升高,APC水平降低；肺組織NF-kB表達(dá)增強(qiáng)。表明膿毒癥時(shí)炎癥反應(yīng)對(duì)PC通路具有抑制作用。
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