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文檔簡介
1、目的:
1.了解raf-1在人結腸癌組織中的表達與腫瘤血管生成的關系,并探討其臨床意義。
2.建立結腸癌裸鼠移植瘤模型,觀察Raf-1在其中的表達,探討Raf-1與腫瘤血管生成的關系。
方法:
收集第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院病理科2005-2007年經病理學診斷確診的87例結腸癌標本,以及相應的距腫瘤1cm區(qū)域的癌旁區(qū)組織標本和距腫瘤5cm區(qū)域的切緣區(qū)組織標本。87例患者中男性55例,女性32例,年齡3
2、1~75歲,平均年齡為(65±0.8)歲。參照臨床及病理資料,分別依據(jù)腫瘤大小、轉移情況、及分化程度將病例分組。所有組織標本均用10%甲醛固定,石蠟包埋。
采用免疫組化法檢測87例結腸癌病例癌區(qū)、癌旁區(qū)及切緣區(qū)組織標本中Raf-1的表達,應用CD34標記的免疫組化法檢測微血管密度(microvessel density,MVD);分析Raf-1表達和MVD與結腸癌體積、轉移、分化等病理特征之間的相關性。
通過West
3、ern blot方法檢測不同結腸癌細胞系(HT-29、SW480、LS174T)中Raf-1的表達,然后將表達差異較大的2株細胞(HT-29、LS174T)分別接種到BALB/cnu/nu小鼠體內,分別觀察腫瘤的生長速度、瘤重變化等情況,最后通過免疫組化的方法分別檢測瘤組織中Raf-1的表達及腫瘤微血管密度(MVD)的情況,分析二者的相關性。
結果:
1.Raf-1在癌組織、癌旁組織、切緣區(qū)組織的陽性率分別為86.4
4、7%,37.34%,11.03%,三者之間的差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。
2.癌組織、癌旁組織、切緣區(qū)組織中MVD值分別為:(61.35±11.6)、(28.34±6.7)、(8.26±3.7),三者之間的差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。
3.Western blot檢測HT-29、SW480、LS174T中Raf-1的表達,發(fā)現(xiàn)LS174T中Raf-1的表達量最高,而HT-29表達量最低。因此,選擇LS17
5、4T和HT-29接種至裸鼠。
4.在裸鼠移植瘤模型中,LS174T組移植瘤生長速度及瘤重大于HT-29組。
5.免疫組化結果顯示:Raf-1在LS174T組中的強陽性率為50%,在HT-29組中為10%,兩組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
6.在LS174T組中MVD平均值為28.32±5.2,HT-29組MVD平均值為19.23±4.7,兩組之間MVD值差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
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