泛素與細胞周期蛋白B1在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、背景和目的：
　　卵巢上皮性惡性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)常見三大惡性腫瘤之一,早期常無特異性臨床癥狀,患者就診時已多屬晚期,死亡率居婦科惡性腫瘤首位,5年生存率徘徊在30％~40％。CA125是唯一確認診斷的輔助敏感指標,且80％的上皮性卵巢癌患者血清中可檢測到CA125水平升高,但其水平高低在臨床上僅用于監(jiān)測卵巢癌患者治療中的病情緩解及惡化情況,目前仍缺乏相對較特異的生物學標記物用于其早期診斷及預后判斷。
　　因此,尋找有關卵巢

2、癌早期診斷、病情監(jiān)測、預后判斷的新指標,提高卵巢癌患者生存率,是目前卵巢癌研究中至關重要的課題。泛素(Ubiquitin,Ub)及其依賴的非溶酶體途徑在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的作用,它是存在于所有真核組織細胞中的高度保守的多肽,以自由分子或泛素結(jié)合蛋白(或蛋白泛素化)的形式存在。泛素廣泛分布在各種組織,是參與異常蛋白翻譯后修飾的一種組分,其主要作用是參與蛋白質(zhì)的降解。
　　在有功能的泛素鏈接酶系統(tǒng)-特異性ATP依賴性酶的催

3、化下,各種細胞蛋白被泛素化修飾,進而在溶酶體和非溶酶體兩大系統(tǒng)參與下,泛素化的細胞蛋白被降解。若泛素-蛋白酶體途徑發(fā)生障礙,將影響細胞周期調(diào)控,除了加強一些癌基因的作用外,還可以使一些抑癌基因的作用減弱,進而促使腫瘤發(fā)生。因此,細胞蛋白的泛素修飾對于許多細胞活動過程是至關重要的,包括細胞內(nèi)蛋白的選擇性降解和細胞對各種有害刺激的應激反應及對細胞損傷的保護反應。
　　然而,Ub在卵巢癌中是否存在異常表達,其表達的改變能否影響卵巢癌的發(fā)

4、生、發(fā)展及預后尚不十分清楚。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和惡變與細胞周期的失控密切相關。細胞周期蛋白B1(CyclinB1)是一個經(jīng)典的分裂周期蛋白,參與細胞周期檢查點調(diào)控,促進G2/M期轉(zhuǎn)換而加速細胞周期進程。
　　迄今為止,哺乳動物細胞中發(fā)現(xiàn)B型細胞周期素有6個亞型,稱為CyclinB1~6,CyclinB1主要出現(xiàn)在S期并在此期開始表達,在G2/M時達到峰值,然后迅速被泛素化降解(Ubation),其過表達使細胞周期G2/M轉(zhuǎn)換時間縮短

5、,從而導致細胞癌變。
　　本研究通過免疫組化SP法檢測Ub和CyclinB1蛋白在卵巢上皮性癌中的表達情況,探討其表達與卵巢上皮性癌臨床病理因素、預后的關系,為卵巢癌的臨床診斷、病情監(jiān)測、預后判斷和治療等方面提供科學的實驗數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
　　材料和方法：
　　1.收集我院2004年1月~2007年12月婦科住院患者手術切除的卵巢上皮性腫瘤石蠟包埋組織標本70例及正常卵巢組織標本20例,所有標本術前均未行放療、化療及其

6、他治療。其中卵巢上皮性惡性腫瘤組織標本50例,包括漿液性囊腺癌36例、粘液性囊腺癌9例、子宮內(nèi)膜樣癌5例;卵巢良性腫瘤組織標本20例,包括漿液性囊腺瘤16例、粘液性囊腺瘤4例。
　　2.采用免疫組化SP法檢測20例正常卵巢組織、20例上皮性良性卵巢腫瘤組織及50例上皮性卵巢癌組織中Ub和CyclinB1的表達情況,結(jié)合上皮性卵巢癌的組織學類型、病理分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況進行分析,并研究兩指標間的相關性。
　　3.統(tǒng)計

7、學處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)分析,Ub和CyclinB1蛋白的表達及其與臨床病理學特征的關系采用x2檢驗,Fisher精確概率法,采用Spearman等級相關分析二者的相關性。以α=0.05作為檢驗水準。
　　結(jié)果：
　　1.Ub蛋白在上皮性卵巢癌、良性卵巢腫瘤和正常卵巢組織中的陽性表達率分別為34％(17/50)、10％(2/20)、5％(1/20),CyclinB1的陽性表達率分別為42％(21/50)

8、、15％(3/20)、5％(1/20),兩者在卵巢癌中的陽性表達率均顯著高于正常卵巢組織和良性卵巢腫瘤,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.卵巢上皮性癌中,Ub的表達與組織學分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(P<0.05);與組織學類型無明顯相關性(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌組織中Ub蛋白陽性表達率顯著高于Ⅰ、Ⅱ期,差異有統(tǒng)計學意義(x2=4.529,P<0.05);G3級卵巢癌組織中Ub蛋白陽性表達率顯著高于G1、G2

9、級,差異有統(tǒng)計學意義(x2=3.964,P<0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中Ub蛋白陽性表達率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織,差異有統(tǒng)計學意義(x2=6.269,P<0.05)。
　　3.在卵巢上皮性癌組織中,CyclinB1的表達與組織學分級、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(P<0.05);與組織學類型無明顯相關性(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌組織中CyclinB1蛋白陽性表達率顯著高于Ⅰ、Ⅱ期,差異有統(tǒng)計學意義(x2=5.520,P<

10、0.05);G3級卵巢癌組織中CyclinB1蛋白陽性表達率顯著高于G1、G2級,差異有統(tǒng)計學意義(x2=4.217,P<0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中CyclinB1蛋白陽性表達率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織,差異有統(tǒng)計學意義(x2=6.226,P<0.05)。
　　4.卵巢癌組織中Ub和CyclinB1蛋白表達的相關性:50例卵巢癌組織中Ub蛋白和CyclinB1蛋白均為陽性表達者7例,均為陰性表達者19例,Ub蛋白陽性表達而Cy

11、clinB1蛋白陰性表達者為10例,Ub蛋白陰性表達而CyclinB1陽性表達者為14例,結(jié)果表明兩者的表達水平呈現(xiàn)高度的一致性,經(jīng)Spearman等級相關分析,相關系數(shù)r=0.301,P=0.033,表明Ub和CyclinB1蛋白在卵巢癌組織中的表達呈正相關關系。
　　結(jié)論：
　　1.從正常卵巢組織、良性卵巢上皮腫瘤組織到卵巢上皮性癌組織,Ub和CyclinB1蛋白的陽性表達率逐漸升高,且多表達在臨床分期較晚、組織學分級較