重組人生長(zhǎng)激素促進(jìn)急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、冠狀動(dòng)脈高度硬化或阻塞后，機(jī)體受到缺血缺氧的刺激，局部促血管生長(zhǎng)因子合成增加，刺激內(nèi)皮細(xì)胞遷移、分化、增殖，促進(jìn)缺血組織在原有血管基礎(chǔ)上形成新血管，并相互連接、擴(kuò)展，圍繞病變血管組成內(nèi)源性血管旁路，生成新的側(cè)支血管，以此增加組織的灌注和氧供，這個(gè)過(guò)程稱為血管再生。 血管再生是機(jī)體對(duì)于缺血、缺氧的重要代償反應(yīng)，但這個(gè)自發(fā)性的生理應(yīng)答反應(yīng)通常是不夠的。隨著對(duì)血管再生認(rèn)識(shí)的不斷深入，人們提出了“治療性血管再生”(therapeutic

2、angiogenesis)的概念，即：將外源性促血管再生因子引入組織中增強(qiáng)缺血區(qū)域的血管再生，促進(jìn)側(cè)支循環(huán)，以此達(dá)到改善組織缺血缺氧的目的。 生長(zhǎng)激素(growthhormone，GH)是一種由腺垂體分泌并且在機(jī)體的生長(zhǎng)、發(fā)育和代謝中發(fā)揮著重要作用的激素。GH具有心肌保護(hù)作用，其機(jī)制還不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)GH與血管再生密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)擬探討rhGH對(duì)急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction，AMI)大鼠缺

3、血心肌血管再生的影響及其可能的機(jī)制。 我們采用結(jié)扎大鼠左前降支的方法制備急性心肌梗死大鼠模型，術(shù)后24小時(shí)存活大鼠隨機(jī)分為單純心肌梗死組(MI組)，GH1組：術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始皮下注射rhGH0.2mg·kg-1·d-1，GH2組：術(shù)后24h開(kāi)始皮下注射rhGH1.0mg·kg-1·d-1，另設(shè)假手術(shù)組(SO組)為對(duì)照組，連續(xù)處理28天后，1.利用Ⅷ因子免疫組織化學(xué)染色測(cè)定rhGH對(duì)AMI大鼠缺血心肌微血管密度的影響；2.透射電鏡

4、下觀察各組大鼠缺血心肌超微結(jié)構(gòu)，TTC染色觀察各組梗死面積，多普勒心臟彩超觀察各組心功能；3.RT-PCR及Westernblot檢測(cè)和AMI大鼠缺血心肌促血管再生相關(guān)的指標(biāo)：VEGF、bFGF及IGF-ⅠmRNA表達(dá)和蛋白合成； 結(jié)果： 1.觀察各組大鼠缺血心肌微血管密度的變化，發(fā)現(xiàn)心肌梗死后，大鼠缺血心肌微血管密度顯著增加；rhGH可以進(jìn)一步促進(jìn)AMI大鼠缺血心肌血管再生，增加AMI大鼠缺血心肌微血管密度(19.8±

5、2.9vs.11.2±2.79，P＜0.05，28.5±3.6vs.11.2±2.79，P＜0.01)。GH2組較GH1組效果更加明顯(28.5±3.6vs.19.8±2.9，P＜0.01)。 2.透射電鏡下觀察各組大鼠缺血心肌心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與MI組大鼠相比，GH1組大鼠缺血心肌心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)有所改善，GH2組則有明顯好轉(zhuǎn)。 3.TTC染色發(fā)現(xiàn)與MI組相比，GH1組與MI組相比心肌梗死面積有減小的趨勢(shì)，

6、但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，GH2組心肌梗死面積顯著減小(24.83±6.05vs.32.89±5.13，P＜0.01)。 4.超聲心動(dòng)圖測(cè)定各組心臟功能，結(jié)果提示GH2組AMI大鼠心臟功能顯著改善，而且未發(fā)現(xiàn)明顯的左室肥厚。GH1組AMI大鼠心功能改善不明顯。 5.RT-PCR和蛋白免疫印跡方法觀察各組大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF-ⅠmRNA表達(dá)和蛋白合成的變化發(fā)現(xiàn)：發(fā)現(xiàn)心肌梗死后，大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF

7、-ⅠmRNA表達(dá)及蛋白合成明顯增加；rhGH可以進(jìn)一步促進(jìn)AMI大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF-ImRNA表達(dá)及蛋白合成，GH2組較GH1組作用明顯。 綜上所述，本實(shí)驗(yàn)的主要結(jié)論如下： 1.急性心肌梗死發(fā)生后，機(jī)體可以通過(guò)增加缺血心肌促血管再生因子VEGF、bFGF、IGF-ImRNA表達(dá)和蛋白合成來(lái)增加局部心肌微血管密度，部分代償心肌缺血缺氧 2.rhGH可以促進(jìn)AMI大鼠缺血心肌血管再生 3.