大鼠急性心肌梗死后心肌細(xì)胞增殖和再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察大鼠急性心肌梗死后不同缺血時(shí)段和心臟不同部位心肌細(xì)胞的增殖變化;探討年齡因素對急性心肌梗死后心肌細(xì)胞增殖和再生的影響;評估急性心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡情況;并分析心肌梗死后新生的心肌細(xì)胞在損傷心肌中可能的修復(fù)作用。
　　方法：1.青年和老年大鼠均隨機(jī)各分為兩組，采用經(jīng)口氣管插管后開胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法制成大鼠急性心肌梗死模型，對照組開胸置縫線而不結(jié)扎。2.分別于結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支后的第1、3、5、7、10、14、30

2、及60天處死大鼠，采集各部位心肌組織標(biāo)本。于處死前24和12小時(shí)分別給予腹腔注射5-溴-2-脫氧尿苷(Brdu)，50mg/kg體重。3.采集的左室梗死區(qū)及右室非梗死區(qū)心肌標(biāo)本，行蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察/分析心肌組織病理變化;并用免疫組織化學(xué)方法檢測Brdu陽性細(xì)胞在左室梗死邊緣區(qū)及右室非梗死區(qū)的表達(dá)情況;免疫熒光法測定Brdu和c-kit陽性的心肌細(xì)胞;α-sarcomeric actin抗體檢測增殖的細(xì)胞是否為心肌細(xì)胞;原位

3、末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測急性心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。
　　結(jié)果：1.青年大鼠組急性心肌梗死后第5天梗死邊緣區(qū)和非梗死區(qū)Brdu陽性心肌細(xì)胞明顯增多(p＜0.05);第7天梗死邊緣區(qū)Brdu陽性心肌細(xì)胞達(dá)高峰，為對照組的5.7倍[（1.26±0.15）％比(0.22±0.06)％，p＜0.05]，非梗死區(qū)為對照組的4.2倍[(0.75±0.12)％比（0.18±0.07）％，p＜0.05];第60天兩組則無顯著差別。

4、實(shí)驗(yàn)組第7天梗死邊緣區(qū)的Brdu陽性細(xì)胞數(shù)量為右室非梗死區(qū)的1.7倍(p＜0.05)，第14天為1.4倍(p＜0.05)。
　　2.老年大鼠急性心肌梗死后第5天梗死邊緣區(qū)和非梗死區(qū)Brdu陽性心肌細(xì)胞較青年組明顯增多(p＜0.05)。梗死后第7天，老年大鼠梗死邊緣區(qū)和非梗死區(qū)Brdu陽性率分別為青年組的2.1倍[（2.63±0.12）％比（1.26±0.15）％，P＜0.05]、2.4倍[（1.82±0.57）％比（0.75±0.

5、12）％，P＜0.05]。梗死第30天時(shí)，梗死邊緣區(qū)和非梗死區(qū)兩年齡組之間均已無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)。
　　3.凋亡檢測結(jié)果顯示老年大鼠梗死第1天邊緣區(qū)和非梗死區(qū)凋亡指數(shù)分別為青年組的1.35倍[（41.7±1.6）％比（30.9±3.8）％，p＜0.05]、1.43倍[（26.3±1.6）％比（18.4±3.3）％，P＜0.05];第30天時(shí)兩年齡組之間凋亡指數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4.免疫熒光檢測顯示部分Brdu陽性

6、細(xì)胞心肌肌動(dòng)蛋白標(biāo)記陽性;梗死邊緣區(qū)部分Brdu陽性細(xì)胞c-kit標(biāo)記亦陽性，這些細(xì)胞核形態(tài)較小且圓。
　　結(jié)論：1.急性心肌梗死后，大鼠新生心肌細(xì)胞明顯增多，梗死邊緣區(qū)及右室非梗死區(qū)均顯著高于對照組，實(shí)驗(yàn)組梗死邊緣區(qū)的心肌細(xì)胞增殖/再生又較右室非梗死區(qū)更為明顯;增殖/再生現(xiàn)象呈時(shí)間依賴性。
　　2.老年大鼠心肌梗死后新生心肌細(xì)胞比例高于青年大鼠;梗死后心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量也高于青年組。
　　3.年齡能增加心肌細(xì)胞對缺血損