補(bǔ)瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對(duì)2型糖尿病胰島細(xì)胞修復(fù)的臨床觀察及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、根據(jù)“補(bǔ)瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”的治療方法，將具有“益氣養(yǎng)陰，補(bǔ)腎健脾，潤(rùn)肺清胃，化瘀通絡(luò)”功效的經(jīng)驗(yàn)方黃地吉仙湯應(yīng)用于臨床2型糖尿病的治療，驗(yàn)證由導(dǎo)師寧亞功教授提出的“補(bǔ)瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法對(duì)2型糖尿病的治療效應(yīng)，為臨床治療糖尿病提供新的思路和方法。此外對(duì)2型糖尿病大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，為進(jìn)一步探索“補(bǔ)瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究分為兩個(gè)部分：
　　 第一部分：補(bǔ)瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對(duì)2型糖尿病胰島細(xì)胞修復(fù)的臨床

2、觀察。
　　 目的：探討“補(bǔ)瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法對(duì)2型糖尿病β細(xì)胞修復(fù)的作用，為臨床治療2型糖尿病尋找有效方法。
　　 方法：將符合入選標(biāo)準(zhǔn)的2型糖尿病患者60例，采用簡(jiǎn)單隨機(jī)的方法將受試者分為2組，對(duì)照組和治療組各30例。在相同的飲食和運(yùn)動(dòng)指導(dǎo)的基礎(chǔ)上，對(duì)照組予口服二甲雙胍片治療，治療組給予黃地吉仙湯治療。2組均觀察12周。測(cè)定兩組治療前后的空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)、空腹C肽、體重、體重指數(shù)、穩(wěn)態(tài)模

3、型胰島素抵抗指數(shù)、穩(wěn)態(tài)模型β細(xì)胞功能指數(shù)、肝腎功能安全性指標(biāo)。并收集對(duì)應(yīng)時(shí)間段的臨床癥狀進(jìn)行積分。采用SPSS18.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，進(jìn)行前后對(duì)照及組間對(duì)照，分析研究生化指標(biāo)的變化情況和意義以及臨床癥狀的改善情況。
　　 結(jié)果：⑴治療前兩組一般情況對(duì)比，兩組患者性別、年齡、病程、體重、體重指數(shù)、FPG、血壓均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，可知兩組資料具有可比性。⑵治療后，兩組患者的體重、體重指數(shù)都有明顯的降低(P＜0.01

4、)，兩組相比，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。⑶治療后，兩組患者空腹血糖有顯著降低(P＜0.01)，兩組之間相比沒有顯著差異(P＞0.05)。⑷治療后，與治療前相比，兩組均能顯著降低空腹胰島素水平(P＜0.01)，并能顯著升高空腹C-肽水平(P＜0.01)。兩組間比較無顯著差異(P＞0.05)。⑸治療后，兩組HOMA-IR、ISI與治療前相比均有顯著降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。治療后兩組間比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治

5、療后，兩組HOMA-β與治療前相比均明顯升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，治療后兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。⑹治療后，兩組中ALT、AST、r-GT等肝功能指標(biāo)較前均有降低(P＜0.05)，兩組間比較只有r-GT有差異(P＜0.05)，ALT、AST兩組間無明顯差異(P＞0.05)。治療后，兩組中BUN、CR均無明顯變化(P＞0.05)，兩組間比較無明顯差異(P＞0.05)。⑺)治療后，兩組癥狀積分均明顯減少，與治療前

6、相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（兩組組內(nèi)比較均出現(xiàn)P＜0.01）。兩組間比較，治療組優(yōu)于對(duì)照組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。⑻治療后，兩組臨床療效比較，治療組有效率比對(duì)照組有效率高，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：黃地吉仙湯能顯著改善中醫(yī)臨床癥狀和改善2型糖尿病胰島β細(xì)胞功能，提示其機(jī)制可能與降低血糖、改善胰島素抵抗、減少胰島細(xì)胞凋亡、修復(fù)胰島細(xì)胞等有關(guān)?！把a(bǔ)瀉同施，調(diào)節(jié)平衡”療法指導(dǎo)下組方的黃地吉仙湯有與二甲

7、雙胍相接近的降低血糖等方面的作用，且其臨床癥候療效優(yōu)于對(duì)照組。
　　 第二部分：補(bǔ)瀉同施、調(diào)節(jié)平衡法對(duì)2型糖尿病胰島細(xì)胞修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究。
　　 目的：研究在“補(bǔ)瀉同施、調(diào)節(jié)平衡”治療方法指導(dǎo)下組方的黃地吉仙湯對(duì)糖尿病大鼠胰島細(xì)胞修復(fù)的影響，探討黃地吉仙湯對(duì)減少胰島細(xì)胞凋亡的作用靶點(diǎn)與作用機(jī)理，從而，揭示黃地吉仙湯的作用機(jī)制。證實(shí)黃地吉仙湯在實(shí)驗(yàn)室及臨床上具有改善患者胰島細(xì)胞凋亡及修復(fù)胰島細(xì)胞的作用。
　　 方法：

8、SPF級(jí)雄性SD大鼠60只。設(shè)置正常組10只，余50只利用高糖高脂飼料+一次性小劑量腹腔注射STZ+精神緊張法誘發(fā)2型糖尿病大鼠模型。造模成功后隨機(jī)分為模型組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、二甲雙胍組各10只。各組給藥8周后測(cè)定體重，檢測(cè)FPG等指標(biāo);并取胰腺組織行HE染色和免疫組化染色觀察。
　　 結(jié)果：⑴大鼠一般情況:正常組大鼠的一般情況最好，毛發(fā)光澤，活動(dòng)自如，精神狀態(tài)佳，飲食、飲水及大小便正常，無死亡;模型組

9、大鼠的一般情況最差，毛發(fā)雜亂無光，精神狀態(tài)萎靡，行動(dòng)遲緩，并出現(xiàn)多飲多尿現(xiàn)象。其他各藥物組在造模成功后一段時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)模型組上述情況，經(jīng)給藥治療后均有不同程度改善。⑵體重:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，六組大鼠體重之間有顯著差異，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。進(jìn)一步多重比較，正常組與其他五組比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，其他各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。⑶血清學(xué)指標(biāo):實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，六組間大鼠血糖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。⑷HE染色

10、顯示各組大鼠胰島形態(tài):正常組大鼠胰島豐富，團(tuán)索狀，呈類圓形，胞漿豐富，形態(tài)完整，胞核居中，細(xì)胞邊界清晰。與正常組相比，模型組大鼠胰島數(shù)目明顯減少，細(xì)胞體積較大，形態(tài)不一，分布零散，邊緣不齊，細(xì)胞之間邊界不清，且細(xì)胞核呈偏心分布。與模型組相比，中藥高劑量組與二甲雙胍組胰島形態(tài)明顯改善。中藥中劑量組與中藥低劑量組改善不明顯。⑸胰島素免疫組化染色結(jié)果:陽性信號(hào)表現(xiàn)為細(xì)胞被染色成棕色顆粒。與正常組相比，模型組陽性細(xì)胞明顯減少，各治療組較模型組有

11、不同程度改善。⑹六組大鼠胰腺組織中ki67的表達(dá)指數(shù)均小于1％，相比較而言，正常組、二甲雙胍組及中藥高劑量組的ki67的表達(dá)相對(duì)較多。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)成功誘導(dǎo)了2型糖尿病大鼠的模型，造模一次成功率為90％。HE染色及胰島素免疫組化染色顯示經(jīng)中西藥干預(yù)后，中藥高劑量組、二甲雙胍組的糖尿病大鼠胰島細(xì)胞得到一定的改善，尤其是胰島細(xì)胞分泌胰島素的功能得到一定程度的修復(fù)。ki67免疫組化染色結(jié)果顯示糖尿病并非腫瘤病變，細(xì)胞增殖的程度和