PTEN蛋白在大鼠自體靜脈移植術(shù)后的表達(dá)及意義.pdf

1、 目的：本實(shí)驗(yàn)將以Wister大鼠頸靜脈移植到腹主動(dòng)脈的自體靜脈移植動(dòng)物模型為基礎(chǔ)研究在靜脈移植術(shù)后的血管中PTEN蛋白的表達(dá)情況，作為將PTEN應(yīng)用于臨床治療移植靜脈再狹窄的基礎(chǔ)?！　》椒ǎ簩?50克左右，雌雄各半，3個(gè)月齡的Wistar大鼠48只，隨機(jī)分成6組，每組8只。在顯微鏡下行無(wú)菌顯微外科操作，建立自體頸總靜脈移植到腹主動(dòng)脈動(dòng)物模型。各組分別于術(shù)后1、3、7、14、21、28天手術(shù)切取移植靜脈作為實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本，同時(shí)取對(duì)側(cè)

2、正常靜脈作對(duì)照。進(jìn)行下列檢測(cè)：(1)組織學(xué)染色：10﹪中性福爾馬林固定的標(biāo)本石蠟包埋，做4μm厚血管橫斷面連續(xù)切片，行HE及Verhoeff彈力纖維染色。光鏡下觀察組織學(xué)形態(tài)，并在計(jì)算機(jī)圖像分析儀下分析Verhoeff切片，測(cè)量血管內(nèi)膜厚度。(2)免疫組化染色：應(yīng)用PTEN多克隆抗體SABC法免疫組化染色，并計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比，觀察術(shù)后不同時(shí)間PTEN蛋白的表達(dá)情況。同法應(yīng)用PCNA單克隆抗體免疫組化染色，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比，表示VSM