養(yǎng)陰活血方藥拮抗大鼠環(huán)孢素A慢性腎毒性機理的體內(nèi)實驗研究.pdf

1、[目的]：觀察養(yǎng)陰活血方藥對大鼠鈉耗竭法環(huán)孢素A(CsA)慢性腎毒性模型生長轉(zhuǎn)化因子(TGF-β1)、PA/PAI-1系統(tǒng)、及細胞外基質(zhì)(ECM)代謝調(diào)控過程的影響。在蛋白及基因轉(zhuǎn)錄水平揭示養(yǎng)陰活血方藥抗腎間質(zhì)纖維化的作用環(huán)節(jié)。 [方法]：將50只SPF級SD大鼠隨機分為空白組、依那普利組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組，每組10只。低鹽飼料飼養(yǎng)，以12.5mg/(kg．d)劑量的CsA皮下注射制作大鼠腎毒性模型，同時

2、分別以蒸餾水、依那普利、低劑量中藥、中劑量中藥、高劑量中藥灌飼。于第1、2、3、4周末收集24小時尿，測尿量、血、尿肌酐，計算肌酐清除率。第4周末收獲全部大鼠。取左側(cè)腎臟，RT-PCR法檢測腎間質(zhì)FGF-β、uPA、tPA、PAI-1、FN、Ⅳ型膠原mRNA表達；取右腎作組織學檢查和采用免疫組織化學法檢測TGF-β1、FN、Ⅳ型膠原的表達。結果采用ONE WAY ANOVA方差分析、T檢驗、統(tǒng)計圖等方法進行統(tǒng)計分析。 [結果]：

3、各組大鼠肌酐清除率、24小時尿蛋白定量于第2周末均達高峰，第4周末24小時尿蛋白除空白組繼續(xù)升高，余各組均有改善。第4周末依那普利組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組腎功能改善顯著，肌酐清除率上升(P<0.05)；24小時尿蛋白定量減少(P<0.01)，中藥各組呈劑量依賴性；病理HE染色，可見空白組中部分腎小管萎縮，腎小管上皮細胞變性，壞死較明顯，炎細胞浸潤，膠原纖維增生。其余依那普利組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組

4、改變依次減弱。Masson染色可見在空白組、依那普利組、中藥低劑量組腎小管及腎小球周圍纖維增生，尤以空白組最為明顯；免疫組化染色各組腎間質(zhì)均表達TGF-β1、FN、Ⅳ膠原，而以腎間質(zhì)小管周圍TGF-β1、FN、Ⅳ膠原的表達為明顯。其中空白組最顯著，灌喂依那普利及中藥后表達程度減輕；PCR檢測提示依那普利組、中藥高劑量組大鼠腎間質(zhì)TGF-β1 m-RNA表達強度最低，空白組、中藥低劑量組、中藥中劑量組表達其次；中藥低劑量組、中藥中劑量組、