選擇性血管灌注對兔肝組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能的影響.pdf

1、目的
　　肝細(xì)胞可廣泛用于細(xì)胞的毒理學(xué)、藥理學(xué)等的研究,還可以對乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的進(jìn)入機(jī)制進(jìn)行研究,同時也被國際上作為等待肝移植的“橋梁治療”。從肝組織到肝細(xì)胞需要經(jīng)過細(xì)胞的分離過程,在此過程中肝細(xì)胞的數(shù)目和活性受到多方面的影響?，F(xiàn)對新西蘭大白兔肝臟分別經(jīng)肝動脈、門靜脈、肝動脈和門靜脈同時經(jīng)過第一步灌注后,根據(jù)所得肝組織的微結(jié)構(gòu)的觀察和功能的測定,以期優(yōu)選灌注方式,提高肝細(xì)胞的質(zhì)量。

2、>　　方法
　　健康新西蘭大白兔24只,雌雄不限,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計分為三組(n=8):單獨(dú)肝動脈灌注組(A組);單獨(dú)門靜脈灌注組(V組);肝動脈和門靜脈同時灌注組(A+V組)。術(shù)前禁食禁水12小時,經(jīng)耳緣靜脈麻醉后,經(jīng)腹正中線進(jìn)腹,根據(jù)分組要求在體插管,取肝離體用HCA液進(jìn)行灌注20min后,取灌注充分處肝組織測MDA、SOD值;分別從左肝外葉近肝門處和肝葉尖端處取肝組織,透射電鏡下觀察肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),并進(jìn)行比較。
　　結(jié)果<

3、br>　　?肝組織經(jīng)灌注后的大體情況觀察:經(jīng)肝動脈灌注組及經(jīng)門靜脈和肝動脈同時灌注組,完成灌注后肝組織表面呈比較均勻的灰白色;經(jīng)門靜脈灌注組可見部分組織存在有局限的淤斑,灌注不徹底。
　　?透射電鏡觀察:
　　①對比三組不同灌注組的左肝外葉肝門部及葉尖部肝細(xì)胞電鏡下微結(jié)構(gòu),肝動脈、門靜脈同時灌注組及單獨(dú)肝動脈灌注組的肝組織較正常,單獨(dú)門靜脈灌注的肝細(xì)胞微結(jié)構(gòu)損傷較明顯。
　　?肝組織的SOD、MDA值檢測:
　　

4、①超氧化物歧化酶(SOD)值檢測:經(jīng)檢測比較,單獨(dú)肝動脈灌注組和肝動脈、門靜脈同時灌注組(P>0.05)無明顯差異;單獨(dú)肝動脈灌注組和單獨(dú)門靜脈灌注組(P>0.05)無明顯差異;單獨(dú)門靜脈灌注組和肝動脈、門靜脈同時灌注組有明顯差異(P<0.05),肝動脈、門靜脈同時灌注優(yōu)于單獨(dú)門靜脈灌注。
　?、诒?MDA)值檢測:經(jīng)檢測比較,單獨(dú)肝動脈灌注組和肝動脈、門靜脈同時灌注組(P>0.05)無明顯差異;單獨(dú)肝動脈灌注組和單獨(dú)門靜脈灌