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文檔簡介
1、目的:EMMPRIN及其配體CyPA協(xié)同作用,參與炎癥過程,促進(jìn)炎癥反應(yīng)。由于兩者的表達(dá)發(fā)生于炎癥導(dǎo)致組織降解之前,故兩者作為檢測指標(biāo)早期發(fā)現(xiàn)炎癥發(fā)生成為可能,有利于炎癥的早期診斷、早期預(yù)防和早期治療。因此,本研究擬通過體外實驗對whatman3MM層析濾紙和whatman3#定性濾紙在齦溝液收集及蛋白萃取等方面的性能進(jìn)行比較,為后續(xù)研究選擇合適的采樣材料;檢測慢性牙周炎患者的齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá),探索兩者與牙周
2、炎癥的關(guān)系;對種植體功能負(fù)載1年以上的患者進(jìn)行橫斷面研究,檢測種植體周齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá),為今后探索兩者在種植體周圍炎發(fā)生發(fā)展過程中的作用與機(jī)理提供依據(jù)。
方法:
1.利用whatman3MM層析濾紙(A組)和whatman3#定性濾紙(B組)以及15個遞增體積的血清品紅溶液,分析溶液浸潤長度與溶液體積的關(guān)系,并比較兩種濾紙在收集齦溝液方面的差異;使用相同濃度、不同體積的正常人血清以
3、及相同體積、不同濃度的正常人血清溶液,比較兩種濾紙蛋白萃取性能的差異。
2.收集慢性牙周炎患者(牙周炎組)以及無缺牙、無牙周炎患者(對照組)的天然牙齦溝液,并進(jìn)行相關(guān)臨床檢查,ELISA法檢測齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá),分析兩者的表達(dá)與牙周炎癥的關(guān)系,比較兩組差異。
3.收集接受種植義齒修復(fù)且種植體行使功能1年以上的患者(種植組)的種植體周齦溝液,并進(jìn)行相關(guān)臨床檢查,ELISA法檢測齦溝液中
4、EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá),分析兩者的表達(dá)與各臨床檢查指標(biāo)之間的關(guān)系,比較兩組間的差異。
4.應(yīng)用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。溶液浸潤長度與溶液體積的關(guān)系采用線性回歸分析;EMMPRIN及CyPA的表達(dá)與各臨床指標(biāo)之間的相關(guān)性用Spearman秩相關(guān)分析;組間差異采用方差分析。P<0.05為差異有顯著性。
結(jié)果:
1.兩組濾紙條中溶液浸潤長度與溶液體積均成良好線性關(guān)系;兩組
5、溶液浸潤長度有顯著性差異(P<0.05),溶液體積為0.1μL時,溶液平均浸潤長度AB。當(dāng)使用相同濃度、不同體積的正常人血清時,兩組的萃取液總蛋白濃度無顯著性差異(P>0.05);當(dāng)使用相同體積、不同濃度的正常人血清溶液時,兩組的萃取液總蛋白濃度的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
2.牙周炎組中,GCF總量與EMMPRIN總量、CyPA總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān);EMMPRIN總量與GC
6、F總量、CyPA總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān),與吸煙情況呈負(fù)相關(guān)(P<0.05);CyPA總量與GCF總量、EMMPRIN總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān)。對照組中,GCF總量、EMMPRIN總量及CyPA總量三者中兩兩間均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。在牙周炎組與對照組之間,GCF總量、EMMPRIN總量及CyPA總量的組間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
3.種植組中,PICF總量與EMMPRIN總量、CyPA
7、總量顯著正相關(guān);EMMPRIN總量與PICF總量、CyPA總量、GI及mPLI成顯著正相關(guān);CyPA總量與PICF總量、EMMPRIN總量以及GI呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。在種植組與對照組之間,PICF/GCF總量、EMMPRIN總量、CyPA總量均無顯著性差異(P>0.05)。
結(jié)論:
1.whatman3MM層析濾紙和whatman3#定性濾紙均可使用檢測齦溝液在濾紙條上的遷移距離的方法進(jìn)行齦溝液定量。當(dāng)單位時間內(nèi)
8、齦溝液的分泌量較大時,whatman3#定性濾紙較3MM層析濾紙更為適用。在蛋白萃取性能方面,本研究結(jié)果顯示,兩者無顯著差異。由于后續(xù)研究中牙周炎患者的齦溝液分泌量可能較大,因此后續(xù)研究選用whatman3#定性濾紙作為采樣材料。
2.EMMPRIN及其配體CyPA在牙周健康的患者、慢性牙周炎患者的齦溝液以及接受種植義齒修復(fù)且種植體行使功能1年以上的患者的種植體周齦溝液中均有表達(dá),且兩者表達(dá)呈顯著正相關(guān),即兩者表達(dá)具有協(xié)同
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