細胞周期相關(guān)激酶在大腸癌組織的表達及其意義.pdf

1、研究背景:
　　大腸癌，嚴重威脅人類健康的常見惡性腫瘤之一。在全球大腸癌發(fā)病率中，男性和女性的大腸癌發(fā)病率均居惡性腫瘤的第三位，其死亡率居惡性腫瘤的第四位。據(jù)之前的不完全統(tǒng)計，在中國，大腸癌的發(fā)病率和死亡率分別居惡性腫瘤的第四位和第五位，且近些年來呈現(xiàn)逐漸上升和年輕化的趨勢。其發(fā)病機制目前尚不完全清楚，一般認為其發(fā)生是一個多因素、多步驟的過程，除飲食、環(huán)境、遺傳與體力活動等共同參與其發(fā)生外，還涉及到多基因改變積累的復雜過程。新近研

2、究表明，細胞周期相關(guān)激酶(cell cycle related kinase，CCRK)能夠促進細胞的增殖與分裂，正向調(diào)控細胞周期進程，并且發(fā)現(xiàn)其在多種惡性腫瘤中都伴有過表達;而抑制CCRK基因能使腫瘤細胞周期停滯、細胞克隆形成率和增殖活性降低，CCRK參與的信號通路可能與癌癥的成因與演變有關(guān)。但目前就有關(guān)CCRK基因與大腸癌的發(fā)生及其惡性生物學特征的關(guān)系尚無報道。為此，我們就CCRK在大腸癌組織中的表達及其與臨床病理特征之間的關(guān)系進行

3、了研究。
　　目的:
　　通過對大腸癌與癌周組織、不同病例分型大腸癌患者中CCRK表達水平的比較，以期進一步闡明CCRK表達與大腸癌發(fā)生及其與腫瘤病理分級、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，尋找大腸癌發(fā)生與分期的早期分子生物學指標，為結(jié)直腸癌的早期診斷、預后及治療提供依據(jù)。
　　研究方法:
　　1.采用RT-PCR法比較檢測50例大腸癌及配對癌旁組織中CCRK mRNA的表達水平。
　　2.采用Western-blot法比較檢測

4、50例大腸癌及配對癌旁組織中CCRK蛋白質(zhì)表達水平。
　　3.采用免疫組織化學法檢測CCRK在腫瘤不同分期組織中的表達情況。
　　4.統(tǒng)計分析CCRK基因及蛋白質(zhì)表達水平與患者性別、年齡、腫瘤的大小、位置，腫瘤的病理分化，臨床分期之間的關(guān)系。
　　5.統(tǒng)計學方法采用SPSS17.0軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，兩組間mRNA測定值和蛋白測定值用x±S表示，組間比較采用t檢驗;大腸癌組織與癌旁組織兩組之間表達率的比較采用卡

5、方檢驗，檢驗水準α=0.05。
　　研究結(jié)果:
　　1.RT-PCR方法檢測結(jié)果顯示:大腸癌組織中CCRK mRNA的陽性檢出率為64％(32/50)，明顯高于癌旁組織42％(21/50，x2=4.857，p＜0.05)，CCRK mRNA在大腸癌組織中的相對表達量(2.45±0.92)也明顯高于癌旁組織（1.00±0.21），兩者差異具有顯著性意義(t=4.83，P＜0.05)。
　　2.Western-blot檢測

6、結(jié)果顯示:CCRK蛋白在大腸癌組織中的陽性檢出率為60％(30/50)，明顯高于癌旁組織的40％(20/50)，兩組之間存在統(tǒng)計學差異(x2=5.769，p＜0.05)。CCRK蛋白在大腸癌組織中的相對表達量(2.69±0.87)也明顯高于癌旁組織(1.00±0.28)，兩者差異具有顯著性意義(t=5.81，P＜0.05)。CCRK蛋白在癌旁組織中的表達為弱表達。CCRK蛋白在大腸癌組織以及癌旁組織中的陽性表達情況與mRNA表達情況一致

7、。
　　3.免疫組化的檢測結(jié)果顯示:CCRK蛋白在大腸癌組織切片中的陽性表達主要定位于細胞質(zhì)和核膜，少量定位于細胞核，CCRK在大腸癌中的陽性表達率為52.7％(79/150)，明顯高于癌旁組織的35.2％(58/165)，兩組之間存在統(tǒng)計學差異(x2=9.810，p＜0.05)。
　　4.CCRK表達與臨床病理特征的關(guān)系:CCRK過表達與患者的臨床分期明顯相關(guān)(P=0.046)，PT3-4期大腸癌組織中CCRK mRNA的

8、陽性表達率為85.7％(12/14)，明顯高于PT1-2期的陽性表達率55.6％(20/36，x2=3.979，p=0.046);PN1-2期大腸癌組織中CCRK mRNA的陽性表達率為87.5％(14/16)，明顯高于PN0期的52.9％(18/34，x2=5.640，p=0.018)，提示隨著腫瘤的進展，CCRK的表達逐漸上調(diào)。而與患者的性別、年齡、腫瘤的大小及位置以及腫瘤分化程度無關(guān)(P＞0.05)。
　　研究結(jié)論: