GnRH拮抗劑和雌激素聯(lián)合應用預防順鉑所致小鼠卵巢損害的實驗研究.pdf

1、在過去二十年間，由于癌癥治療技術的不斷提高及支持治療的發(fā)展，許多惡性腫瘤患者的生存率顯著提高，其中，有些甚至達80％-90％。對于這些腫瘤幸存者來說，他們在享受疾病被控制，生命得以延續(xù)的同時，不得不面臨由于治療腫瘤所帶來的各種副反應，甚至是長期的痛苦。如腫瘤患者常采用高劑量化療，可導致生殖功能喪失。這種損害有些是一部分卵巢功能喪失，有些則是完全喪失卵巢功能。流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)在抗腫瘤治療成功后有70-80％發(fā)生了不孕及卵巢功能早衰等卵巢功

2、能受損癥狀。在這些年輕女性，卵巢功能喪失不僅僅是生殖功能的喪失，也伴隨內(nèi)分泌功能喪失，出現(xiàn)一系列內(nèi)分泌激素缺乏的癥狀，包括血管舒縮癥狀、陰道干燥、骨礦物質(zhì)的丟失甚或骨折。這些痛苦長期困繞著她們，嚴重影響她們的生活質(zhì)量和自信心，部分患者甚至因此出現(xiàn)了婚姻破裂或自殺。
　　 順鉑是一種廣譜抗腫瘤制劑，被廣泛應用于多種惡性腫瘤治療，如睪丸、卵巢、膀胱、宮頸、頭頸、乳腺等部位的腫瘤，也應用于小細胞或非小細胞型肺癌，在療效值得肯定的同時，

3、卻引起卵巢功能受損的嚴重副反應。研究表明，在齲齒類動物，順鉑可致卵巢功能損害，如可增加卵泡細胞的凋亡、減少血清中的抗苗勒管激素(AMH)、影響動情周期、減少AMH相關的卵泡的數(shù)量。在人類，順鉑可通過多種機制引起卵巢功能早衰。
　　 所以探索更新更好的措施來保護化療中的卵巢成為一個解決腫瘤幸存者諸多問題中最嚴峻的問題。
　　 因為發(fā)育中的卵泡比處于靜止期的卵泡對化療藥物更敏感，所以提出抑制垂體-性腺軸來減少卵子的產(chǎn)生，使生

4、殖上皮對化療藥物不敏感，達到保護卵巢功能的目的。所以，許多研究者提出應用促性腺激素釋放類似物（GnRH類似物）來抑制垂體-性腺軸，從而抑制化療藥物造成的卵巢損害。
　　 GnRH激動劑可刺激促性腺激素(FSH、LH)短暫增高，所謂“點火”(flare-up)效應，其結果是性激素短暫性的升高，約需1-2周，這段時間可促使原始卵泡發(fā)育為成熟卵泡（即分裂活躍的細胞），而化療藥物恰恰作用于分裂活躍的細胞，這樣可能使卵巢對化療藥物更為敏感

5、。因此有學者提出應用GnRH拮抗劑來代替GnRH激動劑，減少GnRH激動劑所需求的7-14天的等待期，達到抑制垂體-性腺軸的功能。實際上，Meirow等使用GnRH拮抗劑能減少不同劑量的環(huán)磷酰胺所致的原始卵泡的丟失。
　　 GnRH拮抗劑也有副反應，如熱潮紅、骨礦物質(zhì)密度的減低，研究發(fā)現(xiàn)同時應用低劑量的雌激素或應用替勃龍可改善這些副反應，Castelo等學者報道同時應用替勃龍可以減少GnRH拮抗劑所致的血管舒縮癥狀和骨礦物質(zhì)丟失

6、，使長期應用GnRH拮抗劑更安全有效。
　　 目的：
　　 探討促性腺激素釋放激素拮抗劑(GnRH拮抗劑)和雌激素聯(lián)合應用對化療中小鼠卵巢的保護作用。
　　 材料與方法：
　　 1實驗方法
　　 5-6周齡SPF級BALB/c雌性小鼠（體重18±3g），飼養(yǎng)一周熟悉環(huán)境后，每日晨9：00取陰道分泌物涂片觀察性周期，選取有正常性周期的40只小鼠進入實驗，將進入實驗的40只小鼠隨機分為A、B、C、D組

7、，每組10只，A組為對照組，B組為順鉑組，C組為西曲瑞克（GnRH拮抗劑）+補佳樂（雌激素）組，D組為西曲瑞克+補佳樂+順鉑組，用藥后觀察并比較各組小鼠一般狀態(tài)、體重、卵巢、子宮濕重和卵巢組織結構的變化，比較各組小鼠各級卵泡數(shù)量的變化，放射免疫方法測定各組小鼠血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)水平。
　　 2統(tǒng)計學處理
　　 采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計學分析，定量指標組間比較用One·Way ANOVA方

8、差分析，兩組間比較采用LSD，檢驗水準α=0.05
　　 結果：
　　 1．順鉑組小鼠體重、卵巢子宮濕重與其余三組比較明顯減輕，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；西曲瑞克+補佳樂組、西曲瑞克+補佳樂+順鉑組兩組分別比較，與對照組比較，上述重量變化不大，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2．順鉑組小鼠血清E2水平較其余三組明顯下降，F(xiàn)SH水平較其余三組明顯上升，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；西曲瑞克

9、+補佳樂組、西曲瑞克+補佳樂組+DDP組與對照組比較無顯著差別，三組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3．順鉑組與其余三組相比，各期卵泡數(shù)都顯著減少，特別是生長卵泡和成熟卵泡，卵泡總數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;西曲瑞克+補佳樂組和西曲瑞克+補佳樂組+DDP組原始卵泡數(shù)顯著增加，生長和成熟卵泡顯著減少，分別與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但兩組的卵泡總數(shù)與對照組相比無明顯差別，差異無統(tǒng)