廈門部分地區(qū)鮑曼不動桿菌adeABC外排泵基因表達研究.pdf

1、目的：檢測廈門地區(qū)臨床分離的鮑曼不動桿菌耐藥現(xiàn)狀及使用外排泵抑制劑后耐藥性的改變;從分子生物學(xué)水平研究鮑曼不動桿菌adeABC主動外排泵基因的表達水平,并探討該基因表達與其他地區(qū)的相關(guān)報道有無差異,并進一步分析adeABC外排泵與細菌耐藥性之間的相關(guān)性,從而為研究鮑曼不動桿菌多重耐藥機制及預(yù)防其耐藥性擴散提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：(1)收集臨床分離的鮑曼不動桿菌,用紙片擴散法檢測其對青霉素類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類、四

2、環(huán)素、多黏菌素B類以及復(fù)合類抗生素等多種抗生素的耐藥情況,從而對當(dāng)前鮑曼不動桿菌耐藥性現(xiàn)狀做一分析;對耐藥株加用泵抑制劑利血平后再檢測其耐藥性;(2)提取所收集的鮑曼不動桿菌基因作為模板,利用PCR擴增技術(shù)對目的基因adeB及調(diào)控基因adeR、adeS進行篩選,探討目的基因在敏感株和耐藥株表達有無差異;(3)利用實時熒光定量PCR(realtimePCR,RT-PCR)技術(shù)檢測adeB基因表達情況,進一步分析其與外排表型、基因型及耐藥性

3、之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：(1)本實驗中180株鮑曼不動桿菌對所用的幾種抗生素耐藥率如下:哌拉西林93.3％、頭孢吡肟60.0%、頭孢噻肟74.7%、頭孢他啶74.7%、環(huán)丙沙星80.0%、左氧氟沙星78.7%、阿米卡星66.7%、慶大霉素60.7%、亞胺培南15.6%、多粘菌素B0%、哌拉西林/他唑巴坦17.8%;加入外排泵抑制劑后細菌耐藥情況如下,哌拉西林69.4%、頭孢吡肟47.2%、頭孢噻肟47.2%、頭孢他啶47.7%、環(huán)

4、丙沙星62.2%、左氧氟沙星58.9%、阿米卡星42.2%、慶大霉素48.9%、亞胺培南7.2%、多粘菌素B0%、哌拉西林/他唑巴坦10.5%;(2)adeB基因在敏感株和耐藥株中均有表達,adeB雖非鮑曼不動桿菌固有基因,但在該菌中分布廣泛,且在耐藥株中表達高于敏感株;(3)adeABC基因的高表達與細菌耐藥性相關(guān),其過度表達與亞胺培南耐藥有關(guān),并可能介導(dǎo)對復(fù)合類抗生素耐藥,導(dǎo)致多重耐藥甚至泛耐藥現(xiàn)象。
　　結(jié)論：(1)目前鮑曼