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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.通過(guò)福爾馬林體外疼痛模型,探討水通道蛋白1對(duì)疼痛程度的影響。
2.觀察水通道蛋白1在心肌梗死周圍組織中的表達(dá)變化及乙酰唑胺的干預(yù)作用。
3.初步探討水通道蛋白1在心肌梗死內(nèi)臟疼痛中的作用。
方法:
將80只SD(Sprague Dawley)大鼠隨機(jī)分為四組(均n=20):心梗組、心梗乙酰唑胺處理組、假手術(shù)組及假手術(shù)乙酰唑胺處理組。實(shí)驗(yàn)組通過(guò)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前將支近端的方法建立
2、心肌梗死模型,對(duì)照組只開胸不結(jié)扎。應(yīng)用心電圖及TTC(Triphenylte-Trazolium chlorid)染色方法評(píng)價(jià)心肌梗死模型。在成功建立模型后1天、3天、7天及14天通過(guò)福爾馬林疼痛模型觀察動(dòng)物行為學(xué)變化。然后,開胸獲取實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物心肌梗死周圍組織及對(duì)照組動(dòng)物相同部位心肌組織,通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量PCR(Polymerase chain reaction)及蛋白質(zhì)印跡(Westernblot)方法檢測(cè)AQP1的表達(dá)。
3、結(jié)果:
1.在大鼠福爾馬林疼痛模型中,第一時(shí)相,各組大鼠間舔足次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在第二時(shí)相中,與心梗組相比,心梗乙酰唑胺處理組大鼠舔足次數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在第二時(shí)相中,與假手術(shù)組相比,假手術(shù)乙酰唑胺處理組大鼠舔足次數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);且心梗組大鼠舔足次數(shù)明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.在熒光實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果中,心梗組AQP1
4、mRNA水平在3天后升高,7天為最高峰,14天下降至3天水平,與1天相比,7天及14天AQP1mRNA水平升高明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但3天差異不明顯(P>0.05);假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)變化不明顯,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在同一時(shí)間點(diǎn),心梗組和假手術(shù)組分別與心梗乙酰唑胺處理組和假手術(shù)乙酰唑胺處理組的AQP1mRNA水平相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在1天時(shí)間點(diǎn),各組AQP1mRNA水平變化不明顯,差
5、異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在3天、7天機(jī)14天時(shí)間點(diǎn),與假手術(shù)組相比較,心梗組AQP1mRNA水平明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.在Western blot結(jié)果中,與心梗組相比較,心梗乙酰唑胺處理組的AQP1蛋白表達(dá)明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與假手術(shù)組相比,假手術(shù)乙酰唑胺處理組AQP1蛋白表達(dá)明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);心梗組AQP1蛋白表達(dá)明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
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