丹參對大鼠長期心肌梗死的治療作用及其機制研究.pdf

1、盡管當前在藥物和手術(shù)治療冠心病(coronary artery disease，CAD)方面取得長足進步，但它仍將是21世紀人類健康的最大挑戰(zhàn)。缺血性心臟病如心肌梗死以心肌細胞不可逆丟失為主要特征。多年來，人們一直認為：心肌細胞和神經(jīng)元細胞一樣，是一類不能再生的處于分化末端的細胞，補充和取代心肌梗死后引起壞死和凋亡的心肌細胞是一種不現(xiàn)實的想法：然而，近年來的很多研究均證實，心肌梗死后有心肌細胞再生的現(xiàn)象存在。這些新生的細胞多存在于供血充

2、足的梗死區(qū)邊緣和遠端。同時研究也表明受損的心肌中富含各種細胞因子和生長因子，它們可以促進心臟以外的干細胞向損傷區(qū)域募集，促進受損心肌的修復。 血管新生(angiogenesis)指從已存在的脈管系統(tǒng)上長出新的血管，一般情況下是對缺血的生理反應。血管生成過程受促血管生長因子和抑制因子精密調(diào)控，通常只發(fā)生于胚胎發(fā)育，創(chuàng)傷愈合和女性生殖周期。在動物缺血模型的實驗研究中發(fā)現(xiàn)，促血管生長因子可以通過血管新生提高缺血區(qū)營養(yǎng)物質(zhì)的輸送。近年來

3、的臨床研究也證實，應用促血管生成肽刺激血管新生治療冠心病產(chǎn)生鼓舞人心的臨床效果。然而前期的臨床實驗也報道，作為促血管生長因子的重組蛋白或基因雖可以提高新的側(cè)枝血管的形成，但也產(chǎn)生不少缺血綜合征，同時單一應用生長因子的臨床有效性仍然具有爭議。另外動物實驗也證實移植骨髓細胞(bonemarrow cells)、脂肪間質(zhì)細胞(adipose stromal cells)和內(nèi)皮祖細胞(endothelialpmgenitor cells，EPC

4、s)可以促進缺血組織側(cè)枝血管的形成，其機制可能是分化成內(nèi)皮細胞或者旁分泌成血管生長因子。但是，骨髓抽取和細胞移植都是侵入性過程，所以不能經(jīng)常進行。 另外，目前的研究結(jié)果表明氧化應激(oxidative stress)在推動長期心肌梗死向心衰(heart failure，HF)發(fā)展過程中具有很關(guān)鍵的作用。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠冠脈結(jié)扎后，非梗死區(qū)的過度氧化應激伴隨著SOD活性進行性耗竭，進一步加劇心衰的發(fā)展。而抗氧化應激的藥物如二甲叉三脲

5、(dimethylthiourea，DTTu)或丙丁酚(probucol)可以改善左室功能失常，同時也能減少炎性因子的生成以及心肌重構(gòu)。中藥在中國已經(jīng)使用了幾千年，臨床療效確切。與合成的現(xiàn)代西藥相比，天然藥物具有毒副作用小的特點。丹參是中醫(yī)臨床上治療心腦血管疾病的一種常用藥，中醫(yī)認為“一味丹參，功同四物”。丹參因具有改善微循環(huán)，擴張冠脈，抑制血栓形成，抑制血小板黏附和凝集的功效，兩被廣泛應用于治療心腦血管等缺血性疾病。 盡管當前

6、已經(jīng)有很多的臨床證據(jù)表明丹參具有良好的心血管疾病治療作用。而且已經(jīng)有動物實驗證明丹參提取物對急性心肌缺血心肌具有很好的保護作用。然而目前尚無丹參對于急性心肌梗死后長期應用的療效及其可能機制的報道。綜上所述，本研究目的旨在研究丹參提取物的一個純化組分(apurified fraction of thesalvia miltiorrhiza extract，PFSME)對大鼠長期心肌梗死的治療作用，并對其抗氧化以及促進血管新生和心肌再生等作

7、用機制做初步探討。實驗一丹參對大鼠長期心肌梗死治療作用及抗氧化機制研究實驗目的：評價丹參提取物的一個純化組分(PFSME)對大鼠長期心肌梗死的治療作用及其抗氧化機制。實驗方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)建立長期心肌梗死模型。連續(xù)灌胃給予PFSME 4周后，記錄大鼠血流動力學指標；測定血清及心肌組織中SOD和GSH-Px酶活力，血清脂質(zhì)過氧化二級產(chǎn)物MDA含量；放免檢測血漿和心肌組織ET-l水平；Masson三色染色檢測心肌梗

8、死程度。實驗結(jié)果：大鼠心肌梗死后連續(xù)給予PFSME 4周顯示其具有良好的治療效果。血流動力學檢測結(jié)果顯示其具有顯著改善心功能的作用；Masson三色染色結(jié)果說明其顯著降低梗死面積；生化檢測顯示其具有保持血清和心肌組織中SOD和GSH-Px的抗氧化酶的活力在正常生理水平；并顯著降低MDA和ET-1水平。 實驗目的：評價PFSME對促進急性心肌梗死后心肌再生和血管新生，重建血運的作用。 實驗方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支

9、(LAD)建立心肌梗死模型。連續(xù)灌胃給予PFSME 8周后，記錄大鼠的血流動力學指標；通過Masson三色染色和呱染色進行形態(tài)學指標包括心重指數(shù)，梗死面積，梗死長度，左心室周長和內(nèi)徑等的測定；通過計算血管密度評價PFsME對血管新生的作用，并用免疫組化檢測VEGF的表達；心肌再生則通過檢測心肌細胞表達ki-67數(shù)量判定。 實驗結(jié)果： PFSME具有良好的促進血管新生和心肌再生的作用。血流動力學指標顯示治療組心功能得到很大改善。組