瑞舒伐他汀對(duì)心肌梗死大鼠心功能的影響及其機(jī)制.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開(kāi)： 第一部分瑞舒伐他汀對(duì)心肌梗死大鼠心功能的影響及其機(jī)制研究 背景： 心力衰竭終末期細(xì)胞內(nèi)Ca2+穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)及其病理生理變化主要涉及收縮期Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)中的釋放和肌質(zhì)網(wǎng)對(duì)Ca2+的重新攝取等機(jī)制。肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶(sarcoplasmicreticulumCa2+-ATPase，SERCA)和磷酸受鈣蛋白(Phospholamban，PLB)被認(rèn)為是主要的心肌收縮/舒張的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)

2、蛋白。通過(guò)干預(yù)使心力衰竭時(shí)異常的SERCA和PLB表達(dá)恢復(fù)的治療方式有望應(yīng)用于臨床治療心力衰竭患者。 近年來(lái)的一些臨床研究顯示3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑即他汀類(lèi)藥物在心肌梗死后病人中應(yīng)用可以減少心室重塑，改善心功能。但對(duì)其具體機(jī)制的研究中關(guān)于他汀類(lèi)是否可以直接影響鈣調(diào)蛋白的研究很少。 目的： 本課題觀察心肌梗死后瑞舒伐他汀長(zhǎng)期應(yīng)用對(duì)左室重構(gòu)和心功能的影響。并在此基礎(chǔ)上，研究瑞舒伐他

3、汀是否通過(guò)影響心臟的肌漿網(wǎng)鈣調(diào)蛋白SERCA和PLB的表達(dá)而產(chǎn)生對(duì)心功能的影響，同時(shí)檢測(cè)心肌白細(xì)胞介素-6(intedeukin-6，IL-6)和白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的表達(dá)。 方法： 以開(kāi)胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支的方法建立心肌梗死模型。冠脈結(jié)扎一天后，以灌胃方式每天一次給予給藥組大鼠10mg·kg-1的瑞舒伐他汀。對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠以同樣方式給予等量蒸餾水。結(jié)扎冠脈后第2、4、6、

4、8、10周以超聲心動(dòng)圖方法檢測(cè)左室大小(左室舒張末期內(nèi)徑和左室收縮末期內(nèi)徑，即LVIDd和LVIDs)、左室短軸縮短率(FS)、左室射血分?jǐn)?shù)(EF)和舒張末期左室后壁厚度(LVPWd)。結(jié)扎冠脈第2和第10周超聲心動(dòng)圖檢測(cè)大鼠心肌梗死面積，結(jié)扎冠脈10周后測(cè)定左室血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。大鼠處死后，測(cè)量左室、右室重量與體重比值、血脂水平、肌漿網(wǎng)SERCA活性、大鼠心肌組織SERCA2a、PLB和16位絲氨酸磷酸化—PLB(pSer16—PLB)

5、蛋白表達(dá)水平以及心肌梗死區(qū)、梗死周?chē)鷧^(qū)和遠(yuǎn)離梗死區(qū)IL-6和IL-10的表達(dá)水平。 結(jié)果： 10周的瑞舒伐他汀治療未影響實(shí)驗(yàn)各組大鼠的血脂水平和心梗面積。但超聲心動(dòng)圖和血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，心肌梗死大鼠予以瑞舒伐他汀10mg·kg-1灌胃給藥10周后，左室重構(gòu)減輕，心功能明顯改善。同時(shí)，左室心肌降低的SERCA活性、SERCA2a蛋白表達(dá)增高，升高的PLB蛋白表達(dá)不變，pSer16—PLB蛋白表達(dá)升高，降低的pSer1

6、6—PLB/PLB比值增加。衰竭心臟左室梗死周?chē)鷧^(qū)和遠(yuǎn)離梗死區(qū)升高的IL-6水平降低，升高的IL-10水平進(jìn)一步升高。 結(jié)論： 心肌梗死大鼠予以瑞舒伐他汀10mg·kg-1灌胃給藥10周后，顯著改善了左室重構(gòu)和左室功能。該有益作用并非通過(guò)其降脂效應(yīng)或是改變心梗面積而產(chǎn)生。可能與瑞舒伐他汀治療可以部分恢復(fù)鈣調(diào)節(jié)蛋白的異常表達(dá)及對(duì)炎癥因子的致?lián)p傷機(jī)制有一定的減輕作用有關(guān)。 第二部分藻酸雙酯鈉對(duì)心肌缺血再灌注后心功能的

7、影響及機(jī)制探討研究 背景： 藻酸雙酯鈉(Polysaccharidesulfate，PSS)是以海藻提取物為基礎(chǔ)原料，用化學(xué)方法引入有效基團(tuán)合成的一種新型的類(lèi)肝素藥物?；A(chǔ)和臨床研究顯示PSS具有抗凝血、降低血粘度、降低TC和TG、升高HDL—C、降低血小板釋放、明顯的刺激合成PGI2及改善微循環(huán)的功能。臨床上有很多種情況會(huì)出現(xiàn)心臟暫時(shí)性缺血再灌注后心功能下降?；A(chǔ)研究顯示PSS對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。目前關(guān)于

8、PSS對(duì)心肌缺血再灌注后心功能影響的研究未見(jiàn)報(bào)道。 目的： 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用大鼠心肌缺血再灌注后(Langendorff)模型，評(píng)價(jià)急性PSS應(yīng)用能否對(duì)缺血再灌注損傷后心臟的心功能產(chǎn)生影響，并在此基礎(chǔ)上，研究PSS是否是通過(guò)影響心臟絲裂原活化蛋白激酶(mitogen—activatedproteinkinase，MAPK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及腫瘤壞死因子—α(TNF—α)的表達(dá)而產(chǎn)生對(duì)心功能的影響。 方法： 成年雄性

9、Sprague—Dawley(SD)大鼠，隨機(jī)分成8組：A1組(正常對(duì)照組，normalcontrol)：給予改良的Krebs—Henseleit(K—H)液灌注60min；A2組(缺血再灌注對(duì)照組，ischemiacontrol)：缺血20min，復(fù)灌時(shí)給予改良的K—H液灌注60min；A3—A8組(缺血再灌注PSS給藥組，ischemiacontrolplusPSS0.3，1，3，10，30or100)：缺血20min，復(fù)灌時(shí)給予含

10、0.3，1，3，10，30，100mg/LPSS的改良K—H液灌注60min。記錄心臟收縮舒張功能指標(biāo)，包括左心室發(fā)展峰壓(leftventricular灌注developedpressure，LVDP)、左心室舒張末壓(leftventricularenddiastolicpressure，LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升及下降速率(maximumrateofintraventricularpressuredevelopmentandr

11、elaxation；+dp/dtmax，—dp/dtmax)和心率(heartrate)。記錄冠脈流量(coronaryflow)。收集冠脈流出液，測(cè)定其中肌酸激酶(creatinekinase，CK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)含量。裂解心臟組織，測(cè)定心肌組織TNF—α蛋白含量及MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵性調(diào)控蛋白包括細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellularsignal—regulatedki

12、naSes，ERKs)，c—Jun氨基末端激酶(c—junamino—terminalkinase，JNKs)和p38絲裂原活化蛋白激酶(p38mitogen—activatedproteinkinase，p38MAPK)的活性。 結(jié)果： 1～30mg/LPSS可以提高缺血再灌注后心臟的LVDP％、+dp/dtmax％、—dp/dtmax％和冠脈流量百分比，降低LVEDP％，對(duì)心率無(wú)明顯影響。同時(shí)，1-30mg/LPSS

13、明顯降低缺血再灌注后心臟釋放的CK和LDH量，降低心肌組織升高的TNF—α水平及升高的p—p38MAPK和p—p54/p46—JNK蛋白表達(dá)水平。0.3mg/LPSS對(duì)心臟舒縮功能和冠脈流量、心率、CK和LDH釋放、TNF—α水平及p—p38MAPK和p—p54/p46—JNK水平均未產(chǎn)生影響。100mg/LPSS則使本已受損的心功能進(jìn)一步惡化，導(dǎo)致心臟舒縮功能、冠脈流量和心率的明顯下降。0.3～100mg/LPSS對(duì)P—p44/p42