瑞舒伐他汀對大鼠阿霉素心肌損傷的保護作用及其機制研究.pdf

1、目的：本研究通過建立阿霉素擴張型心肌病及慢性充血性心力衰竭大鼠模型，同時采用瑞舒伐他汀進行干預，比較各組大鼠心肌損傷的各項病理指標以及心肌細胞Cx43表達水平和分布情況，以期揭示Cx43蛋白及縫隙連接在阿霉素損傷性心肌病發(fā)生發(fā)展中的作用及瑞舒伐他汀改善心肌損傷的潛在機制，為臨床上采用他汀類藥物防治阿霉素的心臟毒性及各種擴張型心肌病和心衰疾病提供更多的實驗依據。
　　方法：健康成年雄性SD大鼠隨機分為三組，每組8只:1）正常對照組(

2、Control):同樣的方式尾靜脈注射等量生理鹽水，并且用雙蒸水灌胃代替藥物治療;2）阿霉素組(ADM):隔日尾靜脈注射阿霉素，建立ADM-DCM大鼠模型，同時用雙蒸水灌胃代替藥物治療;3）瑞舒伐他汀+阿霉素組(ADM+RSV)，隔日尾靜脈注射阿霉素，注射阿霉素的同時口服灌胃瑞舒伐他汀持續(xù)3周。
　　實驗期間，每天監(jiān)測大鼠的體重變化。三周后，對各組大鼠進行經胸心臟超聲心動圖檢查，觀察大鼠心臟結構及心功能變化，測量LVEDd、LVE

3、Ds、IVS、LVPW，并測定LVEF％、LVFS％等心功能指標。檢測血液ALT、AST、LDH、CK、BNP、TC、TG、LDL-C、VLDL-C、HDL-C、TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C等相關指標。計算全心肥厚指數、左室肥厚指數、肝系數。采用HE染色觀察心臟及肝臟組織病理形態(tài)學變化，免疫組化染色法比較各組大鼠心肌Cx43表達及分布，TUNEL法評估大鼠心肌細胞凋亡比例，以及透射電鏡觀察心肌細胞超微結構的改變。
　　

4、結果：
　　1.一般情況
　　用藥后每天觀察大鼠的一般情況，ADM組大鼠表現(xiàn)出精神、進食飲水及活性明顯下降，實驗末期甚至出現(xiàn)了眼球充血、腹瀉等癥狀，且死亡率明顯高于Control組和ADM+RSV組;ADM+RSV組雖然也出現(xiàn)了與ADM組類似的不良癥狀，但出現(xiàn)的時間較晚，且癥狀較輕。各組死亡率比較，ADM組與Control組比較，差異顯著，ADM+RSV組與Control組比較差異無統(tǒng)計學意義，但與ADM組比較差異有統(tǒng)計學意

5、義。
　　2.大鼠體重、心臟重量及心指數的變化
　　Control組的大鼠體重呈穩(wěn)定性增長，ADM組大鼠體重明顯下降，而ADM+RSV組大鼠體重下降趨勢顯著低于ADM組，較Control組比較無統(tǒng)計學差異。ADM組大鼠的心臟重量特別是左心室的重量高于Control組，全心肥厚指數增高，肝系數相對正常對照組下降;而ADM+RSV組大鼠與ADM組比較心臟重量減輕。但以上差異均無統(tǒng)計學意義。
　　3.瑞舒伐他汀對阿霉素心肌損

6、傷心功能相關指標的影響
　　ADM組大鼠ALT、AST、LDH、CK、BNP等指標與正常對照組比較均明顯上升，而ADM+RSV組上述指標較ADM組顯著下降。
　　4.瑞舒伐他汀對阿霉素心肌損傷血脂相關指標的影響
　　ADM組TG、TC、LDL-C、VLDL-C和動脈粥樣硬化指標（TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C）與Control組比較均增加，而ADM+RSV組的TG、TC、LDL-C、VLDL-C、TC/HDL

7、-C和LDL-C/HDL-C水平較ADM組下降，與Control組比較略低，但無統(tǒng)計學意義。ADM組HDL-C水平與Control組相比明顯下降，ADM+RSV組HDL-C水平的下降幅度減少，但各組間差異無顯著性。
　　5.心臟結構及心功能改變
　　超聲心動圖檢查結果顯示，ADM組大鼠LVEDd和LVEDs較Control組明顯增加，而LVEF％及LVFS％顯著降低。ADM+RSV組與ADM組比較其LVEF％及LVFS％水平

8、明顯升高，而LVEDd和LVEDs則顯著降低。
　　6.心肌組織病理學改變
　　Control組大鼠心臟組織結構正常。ADM組大鼠心臟明顯增大，心臟表面可見灰白病變區(qū)域，兩心室腔擴大明顯，可見心肌松弛、出血、肥大，肌纖維排列紊亂、肌纖維斷裂。心肌細胞核固縮，胞漿內可見空泡形成;ADM+RSV組大鼠心臟體積較ADM組小，且病變區(qū)域少，心腔擴張不明顯，心臟組織結構基本正常，心肌肌纖維結構清晰，細胞核完整。其次，ADM組大鼠肝臟損

9、傷嚴重，肝血竇可見大面積彌漫性出血，肝小葉結構模糊，肝細胞出現(xiàn)濁腫變性，可見淋巴細胞聚集。而ADM+RSV組肝細胞損傷嚴重，可見彌漫性出血，肝細胞腫脹變性，空泡樣變，腫脹處肝細胞胞核染色加深，胞漿空亮。
　　7.瑞舒伐他汀對大鼠心肌組織Cx43表達及分布的影響
　　Control組Cx43免疫組化陽性顆粒規(guī)則排列，心肌細胞排列整齊、結構完整。ADM組Cx43陽性顆粒表達明顯增強且排列紊亂，多位于心室肌細胞的側邊或胞內，心肌組

10、織邊界模糊，損傷嚴重。與ADM組比較，ADM+RSV組的細胞Cx43表達降低，且Cx43陽性顆粒規(guī)則分布于閏盤處，與Control組結構近似。半定量分析結果顯示ADM組Cx43陽性染色面積占總面積的百分比與Control組比較明顯增加，而RSV明顯降低了此百分比，且ADM+RSV組與Control組比較差異無顯著性。
　　8.瑞舒伐他汀對阿霉素損傷大鼠心肌細胞凋亡的影響
　　Control組大鼠沒有或很少見凋亡的心肌細胞，而

11、在ADM組中可見很多凋亡的心肌細胞并且分布范圍較廣，ADM+RSV組心肌細胞凋亡情況與ADM組相比明顯減少。
　　9.透射電鏡觀察心肌細胞連接處超微結構的變化:
　　Control組大鼠心肌細胞肌原纖維排列整齊，閏盤結構完整連續(xù)，形成端-端連接。ADM組大鼠心肌細胞閏盤結構模糊紊亂，局部可見中斷，縫隙連接分布紊亂，位于遠離閏盤處，形成心肌細胞間的側-側連接。而ADM+RSV組閏盤結構基本正常，縫隙連接分布規(guī)則，基本位于閏盤皺

12、褶處。
　　結論：
　　1.通過大鼠一般情況、全心肥厚指數、左心室肥厚指數、超聲心動圖、心肌酶學、血清BNP水平、病理細胞形態(tài)學等指標證實，阿霉素能誘發(fā)大鼠擴張型心肌病。
　　2.阿霉素可引起大鼠心肌細胞Cx43表達異常增加且排列紊亂，提示大鼠阿霉素損傷心肌發(fā)生了Cx43縫隙連接重構。
　　3.阿霉素誘導的擴張型心肌病模型中出現(xiàn)心肌細胞凋亡，并且分布范圍較廣。提示阿霉素引起大鼠心肌細胞凋亡明顯增加。
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