γ射線輻照對血液質(zhì)量的影響及輻照血液的臨床應(yīng)用.pdf

1、目的： 輸血相關(guān)的移植物抗宿主病(TA—GVHD)是一種常見的致命的輸血并發(fā)癥，多發(fā)生于嚴(yán)重的免疫抑制病人，如免疫缺陷、骨髓移植和大劑量的癌癥化療等。最近，有報道非免疫抑制病人輸注HLA不匹配血液以后發(fā)生TA—GVHD。用γ射線輻照血液，可以滅活淋巴細(xì)胞，被認(rèn)為是預(yù)防TA—GVHD唯一有效的方法。但是，最佳劑量的選擇應(yīng)以既能滅活淋巴細(xì)胞，又能保持其他細(xì)胞的正常功能為原則，國內(nèi)外報道還有爭議。許多血液中心基于混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(ML

2、C)的方法來衡量T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的異體免疫反應(yīng)抑制情況，都把15Gy作為最佳劑量。但是，有人報道了1例輸注15Gy輻照紅細(xì)胞的骨髓移植病人發(fā)生TA—GVHD，2例分別輸注15Gy和20Gy血液制品的病人發(fā)生TA—GVHD。因此，我們要進一步明確輻照紅細(xì)胞時，多少劑量可以滅活T淋巴細(xì)胞。 γ射線是利用電離輻射直接損傷T淋巴細(xì)胞DNA，防止其在受者體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)。血液輻照一般有1-4種y射線源，大多數(shù)是137Cs。它不僅能滅活淋巴細(xì)

3、胞，同時也能損害紅細(xì)胞、血小板、粒細(xì)胞等其它細(xì)胞的正常功能。但是，多少劑量輻照可以徹底預(yù)防TA-GVHD，又保持血液的功能，目前還不清楚。Brugnara和Churchill用10、20、30Gy137Cs輻照紅細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外鉀離子濃度存在時間與劑量依賴效應(yīng)，在輻照后25-30天，細(xì)胞外鉀離子濃度幾乎達到了105mmol/L。另外，其它研究也證實細(xì)胞外鉀離子濃度的升高是電離輻射對紅細(xì)胞懸液最明顯的影響。Ramirez和同事也證實30

4、Gy輻照紅細(xì)胞可以使血漿鉀離子濃度從第一天的2.2mmol/L升高到第二天的31.0 mmol/L，第14天就到了68.0 mmol/L。Davey和他的同事卻發(fā)現(xiàn)30Gy的劑量可以使紅細(xì)胞懸液中鉀離子濃度從第一天的1.6mmol/L升高到第42天的78.1 mmol/L。Mintz和Anderson報道30Gy輻照紅細(xì)胞儲存35天后，可以使細(xì)胞外鉀離子濃度升高到68.0 mmol/L。Goes和Ottoboni發(fā)現(xiàn)30Gy輻照紅細(xì)胞后

5、，細(xì)胞外鉀離子濃度第1天、2天、14天、35天、42天分別2.4，20.0，45.0，54.0，55.0 mmol/L。Hillyer和他的同事發(fā)現(xiàn)35Gy輻照紅細(xì)胞儲存42天后，細(xì)胞外鉀離子濃度達到了57.0 mmol/L。Ramirez和他的同事發(fā)現(xiàn)30Gy輻照紅細(xì)胞15天后血漿游離血紅蛋白有顯著升高。同樣，Davey和他的同事也發(fā)現(xiàn)30Gy輻照紅細(xì)胞45天后，血漿游離血紅蛋白濃度顯著增加623.1mg/dl。Mintz和Ander

6、son發(fā)現(xiàn)30Gy輻照紅細(xì)胞34天后，血漿游離血紅蛋白濃度顯著增加314.0mg/dl。從上述引用的研究看，我們不能排除評價輻照對紅細(xì)胞損傷的意義。 最近，有人總結(jié)了TA-GVHD病例。目前為止，輸注未輻照血液成分后，至少引起了87例TA-GVHD的發(fā)生，主要見于以下病人：嚴(yán)重的免疫缺陷病人、胸腺發(fā)育不全、Wiskott Aldrich綜合癥、早產(chǎn)兒、胎兒紅細(xì)胞增多癥、何杰金與非何杰金氏淋巴瘤等惡性血液病人、急性粒細(xì)胞性和淋巴細(xì)

7、胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、成神經(jīng)細(xì)胞瘤等實體瘤病人、橫紋肌肉瘤、官勁癌、小細(xì)胞肺癌、微細(xì)胞瘤、心臟和膽囊手術(shù)病人。TA-GVHD主要發(fā)生在新生兒換血與官內(nèi)輸血后，還發(fā)生在輸注未輻照全血、新鮮冰凍血漿、紅細(xì)胞、血小板。正常獻血者采集的白細(xì)胞以及慢性髓細(xì)胞白血病自身采集白細(xì)胞輸注給惡性血液病人后就容易發(fā)生TA-GVHD。輸血后平均21天內(nèi)，TA-GVHD總的病死率是84％，為了評估目前輻照血液的臨床應(yīng)用情況，我們必須調(diào)查γ射線輻照血

8、液的臨床應(yīng)用。 材料與方法： 2008年6月～2008年11月間，浙江省血液中心ACD-B采集的45249單位的無償獻血者血液，經(jīng)4790×g離心12分鐘，制備成紅細(xì)胞懸液(RBCs)，儲存于2-6℃的冷庫，根據(jù)醫(yī)院預(yù)約，應(yīng)用137Csγ射線輻照(Gammacell3000 ELAM，MDSNordion，Canada)，劑量為25Gy，校準(zhǔn)時間2分鐘50秒，對其中173份RBCs懸液，輻照前后利用無菌接管機留取10ml

9、樣本進行質(zhì)量監(jiān)測。對輻照前后的標(biāo)本分別做PHA刺激的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，測定IL-2、IFN-γ、TNFa、游離血紅蛋白(FHb)、細(xì)胞外鉀(K+)離子、ATP與2，3-DPG含量；統(tǒng)計輻照RBCs的主要臨床應(yīng)用，觀察高風(fēng)險病人輸血后TA-GVHD的發(fā)生率。 結(jié)果： (1)25Gy137Csγ射線輻照后，淋巴細(xì)胞增殖抑制率達到了96.72±1.26％； (2)輻照前后IL-2、IFN-γ、TNFa分泌量有顯著性差異，游