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文檔簡介
1、1青蒿的RTNs研究
1.1從青蒿的EST數(shù)據(jù)庫中挖掘RTNs序列
青蒿為菊科植物黃花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分,其主要藥用成分青蒿素為抗瘧要藥。由于其重要的藥用價值,青蒿成為藥用植物中基因數(shù)據(jù)最為豐富的物種,截止2010年4月,在GenBank中,EST序列有9萬4千余個。從EST數(shù)據(jù)庫中挖掘RTNs序列,對研究青蒿不同組織中的同源基因,認識其復雜的生理和病理過程,分析種內(nèi)遺傳變異以及
2、物種進化關系具有重要的作用。本研究利用CAP3聚類及Bioperl輔助分析,對青蒿的EST數(shù)據(jù)集進行挖掘,篩選出確認為RTNs的青蒿EST contig22個,選擇其中長度大于900bp的contig1個,設計1對PCR引物,通過常規(guī)的PCR驗證,得到與預期序列長度一致的青蒿反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的核苷酸序列,說明預測的序列存在于青蒿基因組中,該數(shù)據(jù)挖掘方案切實可行,為青蒿RTNS的數(shù)據(jù)挖掘提供了新的思路。
1.2青蒿iPBS的條件優(yōu)化
3、
iPBS(inter-Primer binding site)是2010年出現(xiàn)的一種新的分子標記方法,運用iPBS技術可以在沒有已知序列信息的條件下進行,具有適應性強,操作簡單,分辨率高等優(yōu)點。iPBS標記是基于PCR的標記,其反應條件易受各種因素的干擾,為確保iPBS分析結(jié)果的可靠性和重復性,本文通過對PCR反應體系中的模板DNA、Taq DNA聚合酶、dNTP以及Mg2+濃度等最佳反應條件進行探索,建立了適用于青蒿的優(yōu)化
4、的iPBS-PCR的反應體系。該分子標記體系的建立為iPBS標記在青蒿分子標記輔助育種、遺傳多樣性、種質(zhì)資源鑒定等領域提供研究基礎。
2虎杖葉的解剖結(jié)構(gòu)研究
虎杖葉具有平肝潛陽、祛痰息風的功效;性苦,微澀,微寒,歸肝經(jīng)。但虎杖葉并沒有作為常規(guī)中醫(yī)用藥來發(fā)揮其療效,為了節(jié)約藥用植物資源,本研究對虎杖葉的解剖結(jié)構(gòu)進行研究,為開發(fā)出虎杖植株新的藥用部位提供部分依據(jù)。本研究運用生物顯微技術,對虎杖葉進行石蠟切片,通過徒手撕片
5、及粉末制片,其結(jié)果為:虎杖的上表皮細胞排列規(guī)則,近等徑,虎杖的下表皮細胞排列不及上表皮整齊,氣孔僅分布在下表皮,氣孔類型為不定式。橫切面觀,虎杖葉的上下表皮均由一層細胞組成,上表皮細胞較大,近長方形,厚度為66.3μm,下表皮細胞較小,近方形,其厚度為38μm。葉肉中,柵欄組織緊接表皮下方,排成一層,而海綿組織為于柵欄組織與下表皮之間,是典型的兩面葉,柵欄組織細胞呈圓柱形,排列整齊緊密,其中最長的達到95μm,寬為28.5μm,最短的達
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