積雪草苷對(duì)LPS致急性肺損傷保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：急性肺損傷(Actue lung injure，ALI)發(fā)病急而嚴(yán)重，發(fā)病率和死亡率較高，目前仍無有效手段和特效藥治療。大量研究顯示多形核中性粒細(xì)胞引起的一系列復(fù)雜細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)啟動(dòng)和凋亡是急性肺損傷最重要的兩個(gè)機(jī)制。我們通過復(fù)制經(jīng)典的LPS致ALI動(dòng)物模型，觀察積雪草苷對(duì)LPS致ALI動(dòng)物模型有無保護(hù)作用，其作用是否與影響炎癥因子和細(xì)胞凋亡有關(guān)。 方法：將Balb/c小鼠分為空白、模型、假手術(shù)、溶媒、積雪草苷5，15，45

2、mg．kg<'-1>七個(gè)組。通過支氣管滴注內(nèi)毒素溶液20μl(2.5mg．kg<'-1>)造ALI模型。假手術(shù)組滴注無菌生理鹽水20μl。積雪草苷各組提前3天灌胃給藥，溶媒對(duì)照組給予等量羧甲基纖維素鈉，其余各組給予等量生理鹽水。造模24小時(shí)后處死動(dòng)物，取肺、血清和BALF。觀察肺標(biāo)本和HE染色病理切片改變情況，測肺濕重/干重比值，免疫印跡法測COX-2，HO-1蛋白表達(dá)，MPO試劑盒測MPO活性。EIA法檢測血清PGE2含量，ELISA

3、法測BALF的IL-6，IL-10，TNF-α表達(dá)，BCA法測BALF中蛋白含量，Hochest33342染色熒光顯微鏡檢測細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀檢測PMN凋亡率。 結(jié)果和結(jié)論： (1)肺HE染色顯示，模型組和溶媒組鏡下見肺組織充血明顯，大量多核白細(xì)胞浸潤、肺泡壁增寬、肺泡完整性破壞，肺泡腔內(nèi)可見出血和滲出，肺呈現(xiàn)急性炎癥表現(xiàn)，病理形態(tài)證實(shí)急性肺損傷炎癥模型建立成功。同模型組比較，積雪草苷各組呈劑量依賴性的減輕白細(xì)胞浸潤，

4、肺間質(zhì)水腫和肺泡壁充血增寬等炎癥表現(xiàn)，降低白細(xì)胞數(shù)目和白細(xì)胞中性粒細(xì)胞分類，減少BALF蛋白含量，降低肺濕重/干重比值，表明使用AS后減少炎性細(xì)胞和蛋白滲出，肺水腫程度明顯減輕，對(duì)LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷有保護(hù)作用。 (2)同模型組比較，結(jié)果顯示積雪草苷呈劑量依賴性的減少BALF中IL-6,TNF-α含量，促進(jìn)BALF中IL-10分泌，減少血漿PGE<,2>含量，減少肺組織MPO活性，抑制肺COX-2蛋白表達(dá)，促進(jìn)肺HO-1蛋白表