夏至草多糖的提取、分離純化及抗氧化活性研究.pdf

1、夏至草為唇形科夏至草屬植物夏至草(Lagopsis supina)的全草。又名小益母草、白花益母草、白花夏枯草等。廣泛分布于華北、東北、西南、西北等地區(qū)?！侗静菥V目》中記載的茺蔚白花者應(yīng)是夏至草，可活血去瘀、調(diào)經(jīng)、降氣逆、平肝潛陽，用于月經(jīng)不調(diào)、半身不遂、血滯經(jīng)閉、貧血性頭昏等疾病。通過現(xiàn)代藥理研究表明，夏至草醇提物具有明顯的活血化瘀作用以及抗氧化作用。多糖是廣泛存在于植物、動(dòng)物、微生物組織中的一類天然高分子化合物，是維持生命正常運(yùn)轉(zhuǎn)的

2、基本物質(zhì)之一，具有抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫等多種生理活性，且無毒副作用。夏至草多糖是夏至草主要的活性成分之一，因此對其進(jìn)行深入系統(tǒng)的研究將能為夏至草資源的進(jìn)一步開發(fā)利用提供必需的理論依據(jù)。目前，夏至草多糖的研究尚未見報(bào)道，本課題選取張家口地區(qū)的夏至草為材料，對夏至草多糖的提取、分離純化、生物活性等方面進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究，旨在為天然資源的綜合利用提供先進(jìn)的技術(shù)支持，對進(jìn)一步深入開發(fā)利用夏至草資源具有重要的意義。
　　本文首先采用常

3、規(guī)回流提取法和超聲波提取法對夏至草多糖進(jìn)行了提取，比較二者的多糖提取率，結(jié)果常規(guī)回流提取法多糖提取率為2.36％，而超聲波提取法的多糖提取率只有0.18％。通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，優(yōu)化了夏至草多糖常規(guī)回流提取的提取工藝。確定夏至草多糖常規(guī)回流提取最佳工藝條件為:提取溫度100℃，提取時(shí)間2.5h，料水比1∶20，提取兩次。在該條件下夏至草多糖的提取率為2.32％。
　　其次，選用了一些大孔吸附樹脂和陰離子交換樹脂對夏至草粗多糖進(jìn)

4、行了脫色、脫蛋白的實(shí)驗(yàn)研究，以脫色率、蛋白去除率和多糖保留率及3個(gè)指標(biāo)的加權(quán)綜合評分為依據(jù)，比較D-101、DM-301、AB-8、AES-7、ADS-7等大孔吸附樹脂和陰離子交換樹脂對夏至草多糖的脫色、脫蛋白效果，篩選出大孔吸附樹脂ADS-7效果最好，其脫色率、蛋白去除率和多糖保留率分別為94.6％、91.2％和64.3％。通過正交試驗(yàn)，進(jìn)一步優(yōu)化ADS-7脫色、脫蛋白的工藝條件為:溫度45℃，時(shí)間1.5h，料水比1∶40。
　

5、　經(jīng)脫色、脫蛋白的夏至草多糖通過DEAE-52纖維素和SephadexG-150凝膠柱層析，進(jìn)行進(jìn)一步分離純化，得到了LSP1和LSP2兩個(gè)個(gè)多糖分級組分，經(jīng)HPGPC鑒定為均一多糖。經(jīng)HPGPC測定LSP1和LSP2的分子量分別為111905Da和2540364Da。
　　本文最后通過水楊酸-Fe2+-H2O2體系、二苯代苦味肼基自由基(·DPPH)體系和鄰苯三酚自氧化法對分離純化的2個(gè)夏至草均一多糖組分的抗氧化作用進(jìn)行了研究。

6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在清除·OH方面，LSP2＞LSP1。當(dāng)濃度達(dá)到200mg·L-1時(shí)，清除率分別為72.2％和30.5％，而且LSP1和LSP2對羥基自由基的清除作用均弱于維生素C。在清除·DPPH方面，LSP1＞LSP2。當(dāng)濃度達(dá)到300 mg·L-1時(shí)，清除率分別為48.9％和18.2％，而且二者均遠(yuǎn)遠(yuǎn)地弱于維生素C。在清除·O2-方面，LSP1的清除作用較弱，當(dāng)濃度達(dá)到200mg·L-1時(shí)，清除率僅為35.8％。LSP2在0～200