桑椹多糖的提取純化及抗氧化活性初步研究.pdf

1、桑椹為一種藥食兩用的水果，作為食品，其營(yíng)養(yǎng)豐富，味甘甜;作為中藥材，其藥理作用受到許多人的開發(fā)與研究，具有滋陰補(bǔ)血、清熱生津、延年益壽的功效，治療失眠、便秘、耳鳴、須發(fā)早白等癥狀。而多糖是其中可以發(fā)揮重要作用的一種活性成分，是經(jīng)過多個(gè)單糖脫水縮合而成的聚合物，具有抗氧化、降血脂血糖以及抗炎活性等。本論文以桑椹鮮果為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，對(duì)其多糖進(jìn)行提取分離、純化以及結(jié)構(gòu)鑒定。運(yùn)用超聲波提取桑椹多糖的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，從而達(dá)到優(yōu)化提取工藝的目的，通過優(yōu)

2、化條件，提取到大量桑椹粗多糖樣品，然后對(duì)桑椹粗多糖進(jìn)行分離純化，對(duì)其單糖組成進(jìn)行了定性及定量研究，而后對(duì)純化的幾種桑椹多糖進(jìn)行體外抗氧化研究。為桑椹功能成分提取分離鑒定和桑椹產(chǎn)品標(biāo)志性成分檢測(cè)提供參考，從而為桑椹多糖的進(jìn)一步研究開發(fā)奠定一定的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)通過單因素試驗(yàn)，選取最適合的條件對(duì)桑椹粗多糖進(jìn)行響應(yīng)面的工藝優(yōu)化設(shè)計(jì)，不同因素對(duì)于桑椹多糖提取率的影響程度強(qiáng)弱為:浸提溫度＞超聲時(shí)間＞水料比＞超聲功率

3、，確定了優(yōu)化的桑椹多糖提取工藝參數(shù):浸提溫度為72℃，超聲功率為106W，超聲時(shí)間為48 min，水料比為42∶1(mL/g)，在此條件下，桑椹多糖提取率達(dá)到8.41％。超聲提取后得到的粗多糖為分離純化的樣品。
　　(2)通過透析去除蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)，而后得到的桑椹粗多糖經(jīng)纖維素DEAE-52柱層析，通過蒸餾水、0.2mol/l、0.3mol/lNaCL洗脫后得到相對(duì)稱的洗脫峰，分別對(duì)其進(jìn)行濃縮，凍干，并分別命名為MBP-1、M

4、BP-2、MBP-3。對(duì)MBP-2進(jìn)行高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)測(cè)定多糖MBP-2是一種雜多糖，1.2171×105Da平均分子量。再將多糖MBP-2進(jìn)行傅立葉變換紅外光譜(FTIR)分析它是典型的糖類物質(zhì)，研究了它的主要官能團(tuán)組成，吸收峰主要在3411、2926、1639、1415和1080cm-1，分別代表-OH、-CHZ-、-CHO、-COOH、C-O-H。GC-MS單糖組成結(jié)果表明，MBP-2主要是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖

5、、甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成的雜多糖，其摩爾比為:鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=0.6∶0.1∶0.066∶0.05∶0.207∶1.034。
　　(3)桑椹多糖MBP、MBP-1、MBP-2、MBP-3不僅對(duì)于DPPH·、羥自由基(·OH)、超氧陰離子(O2·-)有一定清除能力，而且有一定的還原力和螯合金屬離子的能力。而且伴隨著質(zhì)量濃度的增加，桑椹多糖在一定的范圍內(nèi)，表現(xiàn)出來良好的量效關(guān)系。
　　由上可見